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¿Cuál es la sustancia que liberan los tumores que estimula el crecimiento de los vasos sanguíneos pero suprime su liberación de otros tumores?

¿Cuál es la sustancia que liberan los tumores que estimula el crecimiento de los vasos sanguíneos pero suprime su liberación de otros tumores?


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Actualmente estoy en la escuela secundaria y estoy trabajando en un proyecto de investigación sobre el cáncer. Mi proyecto consiste en un cáncer y diferentes formas de tratarlo. Tengo un conjunto de tumor benigno y estaba pensando en una forma inmediata de tratarlo sin usar un medicamento como Taxol para destruir partes de la célula y simplemente extirpar el tumor.

Sin embargo, recordé haber aprendido hace un año y medio sobre una sustancia que los tumores liberan para estimular el crecimiento de los vasos sanguíneos hacia ellos, pero esta misma sustancia suprime la liberación de sí misma por otro tumor (con suerte, esto tiene algún sentido). Hice unos dibujos que se adjuntan aquí:

Escenario 1: el primer tumor en el flujo sanguíneo libera una sustancia desconocida, que promueve el crecimiento de los vasos sanguíneos, pero suprime la liberación de la misma sustancia de otro tumor detrás de él.

Escenario 2: Se extrae el primer tumor y ahora el segundo tumor comienza a liberar la sustancia, porque la liberación del primer tumor ya no suprime la liberación del segundo tumor.

¿Alguien sabe el nombre de esta sustancia y puede alguien ayudarme a aprender más sobre ella? Gracias.


Una señal muy importante para la angiogénesis son los Factores de crecimiento del endotelio vascular (VEGF) (un pequeño grupo de ~ 5 proteínas similares). Generalmente promueven la generación de nuevos vasos sanguíneos y la migración de estos hacia la fuente de expresión de VEGF.
El bloqueo de la señalización de VEGF (principalmente el bloqueo de los receptores con anticuerpos) ha sido una estrategia bastante buena en el tratamiento del cáncer, ya que los tumores no pueden crecer más de cierto tamaño sin el suministro de sangre de los vasos recién desarrollados.

Sin embargo, no conozco ningún mecanismo de señalización específico de los vasos sanguíneos que detenga su propia expresión en un sitio secundario. (Sin embargo, esto puede ser posible, especialmente para señales específicas)


Las galectinas son una familia de proteínas de unión a beta-galactósidos implicadas en la modulación de las interacciones célula-célula y célula-matriz. Estas proteínas son producidas por células tumorales y promueven la angiogénesis.

Estas galectinas secretadas son utilizadas por las células endoteliales para mejorar la migración y la proliferación. Y desempeñan diversas funciones durante el desarrollo del tumor, como la adhesión celular, la movilidad celular, la angiogénesis inducida por el tumor y la apoptosis.

Vía: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5855652/

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/27649167


Contenido

Cuando un tumor estimula el crecimiento de nuevos vasos, se dice que se ha sometido a un "cambio angiogénico". El principal estímulo para este cambio angiogénico parece ser la privación de oxígeno, aunque también pueden influir otros estímulos como la inflamación, las mutaciones oncogénicas y el estrés mecánico. El cambio angiogénico conduce a la expresión tumoral de factores proangiogénicos y aumenta la vascularización del tumor. [4] Específicamente, las células tumorales liberan varios factores paracrinos proangiogénicos (incluida la angiogenina, el factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF), el factor de crecimiento de fibroblastos (FGF) y el factor de crecimiento transformante β (TGF-β). Estos estimulan la proliferación de células endoteliales. , migración e invasión que dan como resultado nuevas estructuras vasculares que brotan de los vasos sanguíneos cercanos. Las moléculas de adhesión celular, como las integrinas, son críticas para la unión y migración de las células endoteliales a la matriz extracelular. [4]

Inhibición de la vía de VEGF Editar

La inhibición de la angiogénesis requiere un tratamiento con factores anti-angiogénicos, o fármacos que reduzcan la producción de factores pro-angiogénicos, impidan que se unan a sus receptores o bloqueen sus acciones. La inhibición de la vía de VEGF se ha convertido en el foco de la investigación de la angiogénesis, ya que aproximadamente el 60% de los tumores malignos expresan altas concentraciones de VEGF. Las estrategias para inhibir la vía de VEGF incluyen anticuerpos dirigidos contra VEGF o VEGFR, híbridos de VEGFR / VEGFR solubles e inhibidores de tirosina quinasa. [4] [5] El inhibidor de la vía del VEGF más utilizado en el mercado actual es el bevacizumab. [ cita necesaria ] Bevacizumab se une a VEGF e inhibe su unión a los receptores de VEGF. [6]

La angiogénesis está regulada por la actividad de estimuladores e inhibidores endógenos. Los inhibidores endógenos, que se encuentran en el cuerpo de forma natural, están involucrados en el proceso diario de regular la formación de vasos sanguíneos. Los inhibidores endógenos a menudo se derivan de la matriz extracelular o de las proteínas de la membrana basal y funcionan interfiriendo con la formación y migración de células endoteliales, la morfogénesis del tubo endotelial y la regulación negativa de genes expresados ​​en células endoteliales.

Durante el crecimiento del tumor, la acción de los estimuladores de la angiogénesis supera el control de los inhibidores de la angiogénesis, lo que permite el crecimiento y la formación de vasos sanguíneos no regulados o menos regulados. [7] Los inhibidores endógenos son objetivos atractivos para la terapia del cáncer porque son menos tóxicos y es menos probable que produzcan resistencia a los medicamentos que algunos inhibidores exógenos. [4] [5] Sin embargo, el uso terapéutico de inhibidores endógenos tiene desventajas. En estudios con animales, se requirieron altas dosis de inhibidores para prevenir el crecimiento tumoral y el uso de inhibidores endógenos probablemente sería a largo plazo. [7]

Inhibidores Mecanismo
VEGFR-1 y NRP-1 solubles receptores señuelo [8] para VEGF-B y PIGF
Angiopoyetina 2 antagonista de la angiopoyetina 1
TSP-1 y TSP-2 inhibir la migración celular, la proliferación celular, la adhesión celular y la supervivencia de las células endoteliales
angiostatina y moléculas relacionadas inhibir la proliferación celular e inducir la apoptosis de las células endoteliales
endostatina inhibir la migración celular, la proliferación celular y la supervivencia de las células endoteliales
vasostatina, calreticulina inhibir la proliferación celular de células endoteliales
factor plaquetario-4 inhibe la unión de bFGF y VEGF
TIMP y CDAI inhibir la migración celular de las células endoteliales
Meth-1 y Meth-2
IFN-α, -β y -γ, CXCL10, IL-4, -12 y -18 inhibir la migración celular de las células endoteliales, regular a la baja el bFGF
protrombina (dominio kringle-2), fragmento de antitrombina III inhibir la proliferación celular de células endoteliales
prolactina VEGF
VEGI afecta la proliferación celular de las células endoteliales
SPARC inhibir la unión y la actividad de VEGF
osteopontina inhibir la señalización de la integrina
maspin inhibe las proteasas
canstatin (un fragmento de COL4A2) inhibe la migración de las células endoteliales, induce la apoptosis [9]
proteína relacionada con proliferina proteína lisosomal de unión a manosa 6-fosfato [10]

Un método reciente para la administración de factores anti-angiogénesis a regiones tumorales en pacientes con cáncer utiliza bacterias modificadas genéticamente que pueden colonizar tumores sólidos. en vivo, tal como Clostridium, Bifidobacterias y Salmonela agregando genes para factores anti-angiogénicos como endostatina o quimiocina IP10 y eliminando cualquier gen de virulencia dañino. También se puede agregar un objetivo al exterior de las bacterias para que se envíen al órgano correcto del cuerpo. Luego, las bacterias se pueden inyectar en el paciente y se ubicarán en el sitio del tumor, donde liberan un suministro continuo de los medicamentos deseados en las cercanías de una masa cancerosa en crecimiento, lo que evita que pueda obtener acceso al oxígeno y, en última instancia, matando de hambre a las células cancerosas. [11] Se ha demostrado que este método funciona tanto in vitro como in vivo en modelos de ratones, con resultados muy prometedores. [12] Se espera que este método se convierta en algo común para el tratamiento de varios tipos de cáncer en humanos en el futuro. [ cita necesaria ]

Dieta Editar

Algunos componentes comunes de las dietas humanas también actúan como inhibidores leves de la angiogénesis y, por lo tanto, se han propuesto para la prevención de la angiogénesis, la prevención de la metástasis mediante la inhibición de la angiogénesis. En particular, los siguientes alimentos contienen inhibidores importantes y se han sugerido como parte de una dieta saludable para este y otros beneficios:

    como el tofu y el tempeh (que contienen el inhibidor "genisteína") [13]
  • Agaricus subrufescens hongos (contienen los inhibidores piroglutamato de sodio y ergosterol) [14] [15] (Rubus occidentalis) extracto [16] (mediante la inhibición de VEGF y TGF-beta) [17]
  • Trametes versicolor hongos (polisacárido-K) [18] [19] [20]
  • Maitake hongos (a través de la inhibición de VEGF) [21]
  • Phellinus linteus hongos [22] (a través de la sustancia activa interfunginas A inhibición de la glicación) [23] (catequinas) [24] (ácido glicirrícico) [25] (resveratrol) [25]
  • Hierbas medicinales y fitoquímicos antiangiogénicos [26] (ácido de abeja reina) [27]

Drogas Editar

La investigación y el desarrollo en este campo han sido impulsados ​​en gran parte por el deseo de encontrar mejores tratamientos contra el cáncer. Los tumores no pueden crecer más de 2 mm sin angiogénesis. Al detener el crecimiento de los vasos sanguíneos, los científicos esperan cortar los medios por los cuales los tumores pueden nutrirse y, por lo tanto, hacer metástasis.

Además de su uso como fármacos contra el cáncer, se están investigando los inhibidores de la angiogénesis para su uso como agentes contra la obesidad, ya que los vasos sanguíneos en el tejido adiposo nunca maduran por completo y, por lo tanto, son destruidos por los inhibidores de la angiogénesis. [28] Los inhibidores de la angiogénesis también se utilizan como tratamiento para la forma húmeda de la degeneración macular. Al bloquear el VEGF, los inhibidores pueden causar la regresión de los vasos sanguíneos anormales en la retina y mejorar la visión cuando se inyectan directamente en el humor vítreo del ojo. [29]

Resumen Editar

Inhibidores Mecanismo
bevacizumab (Avastin) VEGF
itraconazol inhibe la fosforilación, glicosilación, señalización de mTOR, proliferación de células endoteliales, migración celular, formación de lumen y angiogénesis asociada a tumores de VEGFR. [30] [31] [32]
carboxiamidotriazol inhibir la proliferación celular y la migración celular de las células endoteliales
TNP-470 (un análogo de fumagilina)
CM101 activar el sistema inmunológico
IFN-α regulan a la baja los estimuladores de la angiogénesis e inhiben la migración celular de las células endoteliales
IL-12 estimular la formación de inhibidores de la angiogénesis
factor plaquetario-4 inhibe la unión de los estimuladores de la angiogénesis
suramina
SU5416
trombospondina
Antagonistas de VEGFR
esteroides angiostáticos + heparina inhibir la degradación de la membrana basal
Factor inhibidor de la angiogénesis derivado del cartílago
inhibidores de metaloproteinasas de matriz
angiostatina inhibir la proliferación celular e inducir la apoptosis de las células endoteliales
endostatina inhibir la migración celular, la proliferación celular y la supervivencia de las células endoteliales
2-metoxiestradiol inhibir la proliferación celular y la migración celular e inducir la apoptosis de las células endoteliales
tecogalan inhibir la proliferación celular de células endoteliales
tetratiomolibdato quelación de cobre que inhibe el crecimiento de los vasos sanguíneos
talidomida inhibir la proliferación celular de células endoteliales
trombospondina inhibir la migración celular, la proliferación celular, la adhesión celular y la supervivencia de las células endoteliales
prolactina VEGF
αVβ3 inhibidores inducir la apoptosis de las células endoteliales
linomida inhibir la migración celular de las células endoteliales
ramucirumab inhibición de VEGFR2 [33]
tasquinimod Desconocido [34]
ranibizumab VEGF [35]
sorafenib (Nexavar) inhibir quinasas
sunitinib (Sutent)
pazopanib (Votrient)
everolimus (Afinitor)

Bevacizumab Editar

A través de la unión a VEGFR y otros receptores de VEGF en las células endoteliales, VEGF puede desencadenar múltiples respuestas celulares como promover la supervivencia celular, prevenir la apoptosis y remodelar el citoesqueleto, todo lo cual promueve la angiogénesis. Bevacizumab (marca Avastin) atrapa VEGF en la sangre, reduciendo la unión de VEGF a sus receptores. Esto da como resultado una activación reducida de la vía de la angiogénesis, inhibiendo así la formación de nuevos vasos sanguíneos en los tumores. [7]

Después de una serie de ensayos clínicos en 2004, Avastin fue aprobado por la FDA, convirtiéndose en el primer fármaco anti-angiogénesis disponible comercialmente. La aprobación de Avastin por la FDA para el tratamiento del cáncer de mama se revocó posteriormente el 18 de noviembre de 2011. [36]

Talidomida Editar

A pesar del potencial terapéutico de los fármacos anti-angiogénesis, también pueden ser dañinos cuando se usan de manera inapropiada. La talidomida es uno de esos agentes antiangiogénicos. Se administró talidomida a mujeres embarazadas para tratar las náuseas. Sin embargo, cuando las mujeres embarazadas toman un agente antiangiogénico, el feto en desarrollo no formará correctamente los vasos sanguíneos, lo que impedirá el desarrollo adecuado de las extremidades fetales y el sistema circulatorio. A finales de la década de 1950 y principios de la de 1960, nacieron miles de niños con deformidades, sobre todo focomelia, como consecuencia del uso de talidomida. [37]

Cannabinoides Editar

Según un estudio publicado en la edición del 15 de agosto de 2004 de la revista Investigación sobre el cáncer, los cannabinoides, los ingredientes activos de la marihuana, restringen el brote de vasos sanguíneos a los gliomas (tumores cerebrales) implantados debajo de la piel de ratones, al inhibir la expresión de genes necesarios para la producción del factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF). [38]

Efectos secundarios generales de las drogas Editar

Sangrado Editar

El sangrado es uno de los efectos secundarios más difíciles de manejar, esta complicación es algo inherente a la efectividad del fármaco. Se ha demostrado que el bevacizumab es el fármaco con más probabilidades de causar complicaciones hemorrágicas. [ cita necesaria ] Si bien los mecanismos de hemorragia inducidos por agentes anti-VEGF son complicados y aún no se comprenden totalmente, la hipótesis más aceptada es que el VEGF podría promover la supervivencia e integridad de las células endoteliales en la vasculatura adulta y su inhibición puede disminuir la capacidad de renovación de las células endoteliales dañadas. . [39]

Aumento de la presión arterial Editar

En un estudio realizado por ML Maitland, se informó un aumento medio de la presión arterial sistólica de 8,2 mm Hg y diastólica de 6,5 mm Hg en las primeras 24 horas después del primer tratamiento con sorafenib, un inhibidor de la vía del VEGF. [40] [ se necesita fuente no primaria ]

Efectos secundarios menos comunes Editar

Debido a que estos medicamentos actúan sobre partes de la sangre y los vasos sanguíneos, tienden a tener efectos secundarios que afectan estos procesos. Aparte de los problemas de hemorragia e hipertensión, los efectos secundarios menos comunes de estos medicamentos incluyen piel seca y con picazón, síndrome mano-pie (áreas sensibles y engrosadas en la piel, a veces con ampollas en las palmas y plantas de los pies), diarrea, fatiga y falta de sangre. cuenta. Los inhibidores de la angiogénesis también pueden interferir con la cicatrización de heridas y hacer que los cortes vuelvan a abrirse o sangren. En raras ocasiones, pueden producirse perforaciones (orificios) en los intestinos. [39]


Por Yeong Sek Yee y Khadijah Shaari

El concepto de angiogénesis es muy nuevo. No fue hasta 1994 que, después de que el Dr. Judah Folkman & # 8217 el concepto clave de su nueva teoría del cáncer fuera publicado en la revista & # 8220CELL ” que de la noche a la mañana, la angiogénesis se convirtió en uno de los principales objetivos de la investigación del cáncer. Entonces, ¿qué es la angiogénesis?

Brevemente, angiogénesis significa formación de vasos sanguíneos. La angiogénesis tumoral es el crecimiento de nuevos vasos sanguíneos que los tumores necesitan para crecer y esto es causado por la liberación de sustancias químicas por parte del tumor. Por el contrario, el inhibidor de la angiogénesis es una sustancia que puede prevenir la formación de vasos sanguíneos. En la terapia contra el cáncer, un inhibidor de la angiogénesis puede prevenir el crecimiento de nuevos vasos sanguíneos que los tumores necesitan para crecer.

En & # 8220ANTICANCER: UNA NUEVA FORMA DE VIDA, & # 8221 Dr. David Servan-Schreiber, profesor clínico de psiquiatría en la Facultad de Medicina de la Universidad de Pittsburgh, describió los diversos experimentos del Dr. Judah Folkman a fines de los años sesenta y setenta que le dieron (al Dr. Folkman) el primer destello de una corazonada de inspiración salvaje. ¿Qué pasaría si los tumores cancerosos, para expandirse, necesitaran desencadenar el crecimiento de nuevos vasos sanguíneos para alimentarse? Y si eso fuera cierto, ¿y si se pudiera encontrar una manera de detener ese crecimiento? ¿Podrían los cánceres morir de hambre? Experimento por experimento, el Dr. Folkman construyó los conceptos clave de su nueva teoría del cáncer (es decir, angiogénesis). Algunos puntos principales de la teoría del Dr. Folkman (véase la página 52 de ANTICANCER) están:

  • Los micro tumores no pueden convertirse en cánceres peligrosos sin crear una nueva red de vasos sanguíneos para alimentarlos.
  • Para ello, producen una sustancia química llamada angiogenina que obliga a los vasos a acercarse a ellos y a brotar nuevas ramas.
  • Las nuevas células tumorales que se diseminan al resto del cuerpo, es decir, las metástasis, son peligrosas solo cuando pueden, a su vez, atraer nuevos vasos sanguíneos.
  • Los tumores primarios grandes envían metástasis, pero como en cualquier imperio colonial, evitan que estos territorios distantes se vuelvan demasiado importantes al producir otra sustancia química que bloquea el crecimiento de nuevos vasos sanguíneos: la angiostatina (esto explica por qué las metástasis a veces de repente crecer una vez que el tumor principal ha sido extirpado quirúrgicamente)

El Dr. Folkman pasó 20 años en el desierto. Nadie le creyó. Fue despreciado, criticado y descrito como un loco. Otros médicos negaron con la cabeza ante el desperdicio de una gran mente, y se les dijo a los jóvenes investigadores médicos ambiciosos que aceptar un puesto en el laboratorio de Folkman sería la muerte de sus carreras. En & # 8220ANTICANCER, & # 8221 El Dr. Schreiber describió el viaje de 20 años del Dr. Folkman en el desierto como & # 8220Cruzando el postre & # 8221 (página 53). Este es un ejemplo clásico de Schopenhauer & # 8217s diciendo: & # 8211Toda gran verdad pasa por tres fases. Primero, es ridiculizado, luego atacado violentamente y finalmente aceptado como evidente.(página 53). Probablemente este sea el caso en el concepto de alimentos anti-angiogénicos como se describe en las secciones siguientes.

(NB: Quizás, si desea seguir el viaje del Dr. Folkman & # 8217 & # 8220 Cruzando el desierto, & # 8221 lee "LA GUERRA DEL DR FOLKMAN" escrito por el aclamado escritor científico Robert Cooke. Al leer el avance del Dr. Everett Koop, MD, ScD, pronto se dará cuenta de que el título del libro no es La guerra del Dr. Folkman contra el cáncer, sino que fue una guerra contra la comunidad científica y médica que tardó más de 20 años en reconocer. su concepto de angiogénesis).

En la actualidad, la industria farmacéutica ha desarrollado muchos fármacos similares a la angiostatina (como Avastin, Sutent y Nexavar). Pero "su efecto en los humanos cuando se usa solo ha resultado ser decepcionante " (ANTICANCER página 54). Este punto de vista también es compartido por el oncólogo médico Dr. Richard Frank, MD (en LUCHA CONTRA EL CÁNCER CON CONOCIMIENTO Y ESPERANZA) en el que dijo que & # 8230& # 8220aunque se desarrollaron terapias dirigidas (fármacos inhibidores de la angiogénesis como se mencionó anteriormente) con la esperanza de que fueran soluciones mágicas que erradicaran perfectamente el cáncer mediante la focalización selectiva de una molécula crítica, en general no han logrado su noble objetivo & # 8221 (página 180).Los fármacos anti-angiogénesis han producido efectos secundarios más molestos de lo previsto. Como resultado, probablemente no sean las drogas milagrosas esperadas durante tanto tiempo (ANTICANCER página 54).

Según el Dr. David Servan-Schreiber, como alternativa a la espera de la droga milagrosa, existen enfoques naturales que tienen un poderoso efecto sobre la angiogénesis sin efectos secundarios y que pueden combinarse perfectamente con los tratamientos convencionales (página 54). Estos son:

  • Prácticas dietéticas específicas (muchos alimentos naturales anti-angiogénesis se han descubierto recientemente, incluidos los comestibles comunes champiñones, té verde, especias y hierbas).
  • Todo lo que contribuye a reducir la inflamación, la causa directa del crecimiento de nuevos vasos sanguíneos.

Alimentos anti-angiogénesis enumerados por el Dr. Schreiber son té verde, aceitunas y aceite de oliva, cúrcuma y curry, jengibre, verduras cruciformes, ajo, cebolla, puerros, chalotes, cebolletas, verduras y frutas ricas en carotenoides, tomates y salsa de tomate, soja, champiñones, hierbas y especias, algas, bayas, ciruelas, melocotones y nectarinas, frutas cítricas, jugo de granada, vino tinto, chocolate negro, vitamina D, Omega-3, probióticos y alimentos ricos en selenio. (Para una exposición completa de estos alimentos, le recomendamos que lea el Capítulo 8: los Alimentos contra el cáncer . También le instamos a que vea el DVD titulado & # 8220AntiCancer con el Dr. David Servan-Schreiber. & # 8221 Algunos enlaces están disponibles en YouTube.com de la siguiente manera:

a) Historia notable del Dr. David Servan-Schreiber:

B) Defensas naturales para prevenir y tratar el cáncer:

¿Alimentos anti-angiogénicos o anti-angiogénicos?Su médico / oncólogo probablemente se burlará de este concepto con los comentarios habituales & # 8211no probado, no probado científicamente, etc. Pero, francamente, ¿están todos los tratamientos convencionales contra el cáncer probados de manera adecuada, científica e independiente?

¿Quién más ha investigado y escrito sobre factores dietéticos antiangiogénicos bajo el concepto de angiogénesis?

A la vanguardia de dicha investigación se encuentra Dr. William Li MD, el fundador de La Fundación Angiogénesis, la primera organización sin fines de lucro del mundo dedicada a vencer las enfermedades utilizando el nuevo enfoque basado en la angiogénesis, el crecimiento de nuevos vasos sanguíneos capilares en el cuerpo.

Según el Dr. Li, muchos alimentos contienen inhibidores naturales de la angiogénesis. Cuando estos alimentos se consumen y absorben en el torrente sanguíneo, los inhibidores actúan para estimular el sistema existente del cuerpo que suprime la angiogénesis indeseable que puede promover o acompañar a la enfermedad.

La siguiente es una lista de alimentos (según el Dr. Li) que tienen propiedades innatas que inhiben la angiogénesis, por lo que actúan para eliminar los tumores cancerosos del suministro de sangre. Estos son té verde, bayas, cítricos, manzanas, piña, cerezas, uvas rojas, vino tinto, verduras crucíferas, soja, ginseng, champiñones, regaliz, cúrcuma, nuez moscada, lavanda, alcachofas, calabaza, pepino de mar, atún, perejil, ajo, tomate, aceite de oliva, aceite de pepitas de uva, chocolate amargo. (Fuente: Sitio web de la Fundación Angiogénesis: http://www.angio.org).

También le recomendamos que vea un video del Dr. William Li iluminándolo acerca de & # 8220angiogénesis, & # 8221 su impacto en el cuerpo humano, su conexión con el cáncer y cómo puede lidiar con él.

Para ver el video, pruebe los siguientes enlaces: & # 8211

Las ideas visionarias del Dr. Judah Folkman sobre el tratamiento del cáncer sirvieron como punto de partida e inspiraron a dos investigadores canadienses del cáncer a teorizar y confirmar que & # 8220hay cierta debilidad en la armadura de las células tumorales que podría permitirnos mejorar nuestras posibilidades de destruirlas & # 8221 (Por cierto, el capítulo 4 del libro del Dr. Schreiber & # 8220ANTICANCER & # 8221 tiene derecho & # 8220Cancer & # 8217s Debilidad & # 8221) Estos dos investigadores Dr. Richard Beliveau, PhD y Dr. Denis Gingras, PhD trabajó sobre la premisa de que & # 8220 a pesar de su gran poder, su versatilidad y su enorme capacidad para adaptarse a las condiciones hostiles de las células vecinas, las células cancerosas siguen siendo extremadamente dependientes de sus necesidades energéticas. Para crecer, un tumor requiere un suministro constante de oxígeno y nutrientes.. Sus estudios sugieren fuertemente que ciertos tipos de cánceres se pueden prevenir modificando nuestros hábitos alimenticios para incluir alimentos con el poder de combatir los tumores en su origen y así prevenir su crecimiento.

Según el Dr. Believeau y el Dr. Gingras, & # 8220la naturaleza nos proporciona una gran cantidad de alimentos ricos en moléculas con propiedades anticancerígenas muy poderosas capaces de combatir la enfermedad sin causar efectos secundarios dañinos. En muchos aspectos, estos alimentos poseen propiedades terapéuticas similares a las de las drogas sintéticas & # 8221 (Ja, Big Pharma definitivamente ganó & # 8217t me gusta esta declaración)

Algunos de los alimentos específicos investigados por el Dr. Beliveau y el Dr. Gingras son: verduras crucíferas, ajo y cebolla, soja, cúrcuma, té verde, bayas, omegs-3, tomates, frutas frescas y chocolates negros.

El Dr. Beliveau y el Dr. Gingras destilaron los hallazgos de su investigación en un libro simple para el lego: & # 8220 ALIMENTOS PARA COMBATIR EL CÁNCER & # 8221 & # 8211el objetivo de este libro es presentar un resumen de los estudios científicos actualmente disponibles.

Otro médico que cree y ha escrito sobre el tema de la angiogénesis es el Dr. Joel Fuhrman, un médico de familia certificado por la junta que se especializa en prevenir y revertir enfermedades a través de métodos naturales y nutricionales. En este libro & # 8220SUPER INMUNIDAD & # 8221 El Dr. Fuhrman se refirió a la angiogénesis en el Capítulo 3 bajo el título & # 8220La solución contra el cáncer & # 8221Los puntos destacados de esta sección son: & # 8211

  • Muchos alimentos vegetales contienen inhibidores naturales de la angiogénesis. especialmente hongos
  • Inhibidores dietéticos de la angiogénesis ahora se están investigando como una estrategia preventiva para & # 8220 hacer pasar hambre & # 8221 cánceres mientras aún son pequeños e inofensivos.
  • Si nuestra dieta contiene muchos inhibidores de la angiogénesis, puede evitar que los tumores pequeños adquieran un suministro de sangre y crezcan y se vuelvan más agresivos o cancerosos.
  • Algunos alimentos / nutrientes anti-angiogénicos enumerados por el Dr. Fuhrman son verduras allium, bayas, arroz negro, canela, frutas cítricas, verduras crucíferas, semillas de lino, jengibre, uvas, té verde, champiñones, grasas omega-3, pimientos, granada, membrillo, resveratrol, soja, espinacas, tomates y cúrcuma. (Los estudios científicos son citados por el Dr. Fuhiman al final NOTAS)
  • Por otra parte, & # 8220 hay alimentos y nutrientes que promueven la angiogénesis& # 8211y, por tanto, la obesidad y el cáncer. Éstos incluyen panes y dulces a base de harina blanca que elevan los niveles de insulina, y la dieta occidental estándar, rica en grasas y colesterol. Estos alimentos modernos y poco saludables promueven el almacenamiento de grasa además de tener una alta densidad calórica.. Son un doble negativo, mientras que los verdes, los champiñones, las cebollas, las bayas y los otros alimentos enumerados anteriormente son un doble positivo & # 8221

Al concluir el capítulo, el Dr. Fuhrman lamenta que & # 8230 & # 8220 mucha gente opte por rechazar la nueva ciencia incluso cuando la evidencia es abrumadora. Este libro, SUPER INMUNIDAD, pueden ser atacados por personas en posiciones poderosas de autoridad cuyo sustento depende de intereses contrapuestos, como los alimentos & # 8220recreational & # 8221, las drogas y la tecnología médica. ¿Esto te suena familiar?

En & # 8220 LUCHA CONTRA EL CÁNCER CON CONOCIMIENTO Y ESPERANZA, & # 8221 El oncólogo Dr. Richard Frank enfatizó claramente que:

  • La dieta puede promover o inhibir la formación de cáncer de muchas formas.
  • Hay alimentos buenos y malos que influyen en el desarrollo del cáncer.
  • Algunos estudios recientes han confirmado vínculos más directos entre componentes particulares de los alimentos y el cáncer. Se adjunta un enlace clásico.

Aunque & # 8220Los medicamentos anti-angiogénesis (como Avastin, Sutent, Nexavar) evitan que los tumores crezcan los vasos sanguíneos que necesitan para crecer, ninguno es perfecto & # 8221 (página 481). Esta es la opinión del Dr. Keith Block, MD, un oncólogo integrador que explicó que & # 8220 al igual que los tumores pueden cambiar a una segunda vía de crecimiento si su vía primaria está bloqueada por un fármaco de quimioterapia, el tumor puede cambiar a una vía de respaldo para el crecimiento de la sangre vasos sanguíneos cuando la primera vía está bloqueada por un fármaco anti-angiogénesis & # 8221 (página 481).

Así como los cócteles de medicamentos son un área candente de investigación en la oncología convencional, las combinaciones de compuestos anticancerígenos son algunos de los avances más emocionantes en la atención integral & # 8230. existen compuestos naturales que se dirigen a las mismas vías de crecimiento que los productos farmacéuticos de vanguardia (página 505).

Algunos de compuestos naturales que tienen propiedades anti-angiogénicas están bayas (la mayoría de los tipos) que inhiben la producción de VEGF, una vía de crecimiento común, y también previenen la angiogénesis. El compuesto de soja genisteína también inhibe el VEGF y la angiogénesis, que puede ser una de las razones soja se asocia con tasas más bajas de cáncer. Otros compuestos naturales que pueden estimular a las células del sistema inmunológico a buscar e identificar células malignas son: Aloe vera, acemanano, ginseng, curcumina, polifenoles del té verde, resveratrol, hongos, extracto de semilla de uva, etc. (página 505/507)

Todos los comentarios anteriores del Dr. Block están contenidos en su libro más vendido. & # 8220 VIDA SOBRE CÁNCER & # 8221 que le recomendamos que lea todo el libro o al menos el capítulo 4 & # 8220La dieta contra el cáncer & # 8221 En este capítulo, aprenderá por qué no deberías comer lo siguiente cuando tienes cáncer: & # 8211

El Dr. Block cree firmemente que la dieta afecta al cáncer tanto directa como indirectamente. Los nutrientes impactan directamente en los mecanismos por los cuales las células cancerosas crecen y se propagan. Ayudan indirectamente a controlar el cáncer al cambiar las condiciones bioquímicas circundantes que fomentan o desalientan la progresión de la enfermedad maligna. La conclusión es que lo que comes puede marcar la diferencia entre vencer tu enfermedad o dejarla fuera de control (página 56).

Para obtener más información sobre el libro del Dr. Block, visite los siguientes enlaces:

La Dra. Margaret Cuomo, MD, y un radiólogo certificado por la junta, escribieron el libro, "UN MUNDO SIN CÁNCER" dio algunos consejos sobre "Combatir el cáncer con nutrición y actividad física". El Dr. Cuomo sugiere lo siguiente para una dieta para la prevención del cáncer: & # 8211

a) Come más frutas y vegetales - como bayas, verduras crucíferas, tomates, verduras de hoja verde oscuro (página 205).

B) Comprar orgánico - La Agencia Internacional para la Investigación del Cáncer clasifica más de 400 sustancias químicas, incluidas las utilizadas en plaguicidas, como carcinógenos (página 206).

C) Come más fibra - La fibra diluye los carcinógenos en el colon, reduce el tiempo que permanecen allí, mejora la acción antioxidante, o produce bacterias que promueven, o produce bacterias que promueven un tracto digestivo saludable (pág. 206).

D) Evite la carne roja - un creciente cuerpo de evidencia apunta a una asociación entre la carne de res, cerdo, cordero y cabra y los cánceres de colon, próstata, páncreas y riñón (página 208/209). Los carcinógenos también pueden estar presentes en carnes ahumadas, saladas o curadas y en carnes cocinadas a altas temperaturas.

Además de lo anterior, el Dr. Cuomo también aconseja a los pacientes con cáncer que comer más pescado, beber té verde, aumentar el consumo de resveratrol, condimentar la comida con cúrcuma y, por último, limitar los alimentos procesados ​​(páginas 207-209).

Para mayor referencia, lea el artículo del Dr. Cuomo:

Otro destacado médico, Dr. Russell Blaylock, un neurocirujano certificado por la junta, cree que "Los nutrientes bloquean la angiogénesis" (páginas 182/183)… .especialmente el flavonoides de plantas comestibles como la genisteína extraída de la soja, catequinas que se encuentran en extractos de semillas de uva, apigenina y luteolina que se encuentran en altas concentraciones en el apio. En su libro, "ESTRATEGIAS NATURALES PARA PACIENTES CON CÁNCER" El Dr. Blaylock advirtió que hacer dos cosas reducirá significativamente la angiogénesis tumoral:

  • Corregir su proporción dietética de grasas omega-6 y omega-3,
  • Aumentar la ingesta de verduras.

Esencialmente, significa que una dieta de productos omega-3 inhibe la angiogénesisy una dieta rica en grasas omega-6 promueve poderosamente el crecimiento y la propagación del cáncer. La nicotina también aumenta la angiogénesis.

Un destacado investigador del cáncer y asesor científico del Centro de Medicina Alternativa de la Universidad de Texas, D John Boik, PhD es el autor de 2 textos muy científicos ……CÁNCER Y MEDICINA NATURAL y COMPUESTOS NATURALES EN TERAPIA CONTRA EL CÁNCER. En los 2 libros, el tema de la angiogénesis está ampliamente cubierto.

Algunos de los inhibidores naturales de la angiogénesis. están curcumina, EPA y DHA, ajo, melatonina, resveratrol, flavonoides vegetales (genisteína, apigenina, luteolina, quercetina, catequinas del té verde como EGCG). Lea el Capítulo 8-Inhibidores naturales de la angiogénesis. En este capítulo, el Dr. Boik también señaló que… "Los eicosanoides derivados de los ácidos grasos omega-6 facilitan la progresión del cáncer y los eicosanoides derivados de los ácidos grasos omega-3 lo inhiben".

Finalmente, nos gustaría compartir con usted un E-Book o Nook Book que encontramos y está escrito por el Dr. Hratch Karamanoukian, MD y un destacado cirujano cardiovascular y torácico que se ha especializado en cirugía cardíaca mínimamente invasiva, cirugía torácica, cirugía robótica. y trastornos de las venas. En 40 ALIMENTOS QUE COMBATIRAN EL CÁNCER ” comparte su sabiduría de la siguiente manera:

  • Algunos alimentos pueden ayudarlo a defenderse del cáncer, mientras que otros en realidad podrían aumentar su riesgo de cáncer.. Es muy importante conocer los alimentos adecuados para agregar a su dieta.
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Los siguientes son los 40 alimentos que recomienda el Dr. Karamanoukian en su libro:

  • Come mas vegetales ……brócoli, repollo, coliflor, col rizada, champiñones, algas, batatas, nabos, cebollas, calabaza de verano e invierno, espinacas, aceitunas y coles de Bruselas.
  • Agregue más frutas a su dieta… ..tomates, aguacates, toronjas, higos, naranjas, papaya, frambuesas, arándanos, fresas, peras, uvas y limones.
  • Especias, frijoles y otros alimentos para ayudar a combatir el cáncer… ..ajo, semillas de girasol, orégano, cúrcuma, vino tinto, maní, jengibre, té, arroz integral, frijoles negros, linaza molida, quinua, menta y pescado.

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NB: ESTAS NOTAS, COMPILADAS POR YEONG SEK YEE Y KHADIJAH SHAARI, TIENEN ESTRICTAMENTE PARA SU INFORMACIÓN Y NO TIENEN LA INTENCIÓN DE DISMINUIRLE DE BUSCAR TRATAMIENTOS CONVENCIONALES PARA EL CÁNCER. ESTO TIENE QUE SER ÚNICAMENTE SU RESPONSABILIDAD / DISCRECIÓN.


2. Las funciones vasculares anormales afectan el efecto EPR del tumor

Para satisfacer el crecimiento excesivo de células tumorales, los tumores sólidos necesitan inducir y mantener un suministro de sangre tumoral dedicado, lo que se denomina neovascularización. En condiciones tumorales inflamatorias o hipóxicas, las células como las células endoteliales vasculares liberan mediadores de la permeabilidad vascular, lo que da lugar a una mayor permeabilidad vascular tumoral que en el tejido normal, lo que puede demostrarse mediante angiografía [25]. Sin embargo, debido a su corta vida media y la rápida dilución en el torrente sanguíneo, estos mediadores afectan principalmente a los vasos tumorales, pero no a los vasos sanguíneos del tejido normal. En tales regiones, las macromoléculas que varían de 10 a 500 nm (por ejemplo, agente anticanceroso macromolecular, albúmina, inmunoglobulina, micelas, liposomas y conjugados de proteína y polímero) pueden filtrarse selectivamente del lecho vascular y acumularse dentro del espacio intersticial. Sin embargo, en los tumores sólidos, el efecto EPR presenta una gran heterogeneidad. Los tumores muestran diferentes efectos de EPR independientemente de sus tipos y tamaños, pacientes o etapas de desarrollo. Los tumores con alta densidad de vasos sanguíneos (p. Ej., Carcinoma hepatocelular) muestran un fuerte efecto de EPR, mientras que otros con baja densidad vascular (p. Ej., Cáncer de páncreas) muestran un efecto de EPR débil [5]. Por lo tanto, el seguimiento y la evaluación precisos de los efectos de EPR en diferentes tumores es esencial para el desarrollo de planes personalizados mediados por EPR para el tratamiento de tumores.

En principio, debido a la presencia generalizada de EPR en tumores, las nanomedicinas basadas en el efecto de EPR son muy prometedoras para mejorar la eficacia de la farmacoterapia sistémica contra el cáncer. Sin embargo, su potencial anticáncer completo se ha visto obstaculizado debido a barreras biológicas y fisiopatológicas [26]. Obviamente, el sistema vascular de los tumores, que presentan diferente densidad de vasos, madurez, perfusión y tamaño de corte de los poros, podría considerarse uno de los principales factores que afectan el efecto EPR [27]. En esta revisión, resumimos los tres enfoques principales a través de los cuales los vasos sanguíneos tumorales anormales afectan el efecto EPR y los mediadores vasculares relacionados (Tabla 1).

Tabla 1

Relación entre mediadores tumorales relacionados con los vasos sanguíneos y tres características vasculares típicas.

CaracterísticasMediadores vascularesFuncionesTumores con esta sustanciaReferencia
Angiogénesis anormalFactor de crecimiento endotelial vascular (VEGF)Los factores clave en la angiogénesis, los VEGF se unen a la función quinasa de los receptores activados por el receptor de VEGF (VEGFR), lo que desencadena una variedad de cascadas de señalización aguas abajo, como una mayor permeabilidad capilar, producción de óxido nítrico (NO) (relajación del músculo liso vascular), endotelio proliferación celular (CE), migración y supervivencia bajo estrés.Sobreexpresión en la mayoría de los tumores sólidos[28,29,30]
Factor de necrosis tumoral (TNF) - & # x003b1TNF - & # x003b1 media la diferenciación de monocitos en células angiogénicas que apoyan la angiogénesis tumoral. También es una citoquina proinflamatoria multipotente con actividad de permeabilidad vascular, que puede mejorar la fuga vascular al interrumpir la unión de adhesión CE VE-cadherina. [22,31,32,33,34,35,36]
Factor ácido de crecimiento de fibroblastos (FGF) / FGF-1Interactúa con los subtipos de receptores de tirosina quinasa para inducir la proliferación de CE y mantener la angiogénesis tumoral. [37]
FGF básico / FGF-2Controla la angiogénesis induciendo la expresión de VEGF a través de mecanismos paracrinos y endocrinos. [38,39,40]
Factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGF)El PDGF envía señales a través de dos receptores de tirosina quinasa de la superficie celular, el receptor de PDGF & # x003b1 (PDGFR & # x003b1) y el PDGFR & # x003b2, e induce la angiogénesis regulando positivamente la producción de VEGF y regulando la proliferación y el reclutamiento de células perivasculares. [41,42,43]
Factor de crecimiento placentario (PLGF)El PLGF solo se une a VEGFR-1 e induce la angiogénesis tumoral, lo que promueve la supervivencia de las CE en los vasos sanguíneos asociados a tumores. [44]
Factor de crecimiento epidérmico (EGF)Un ligando clave del receptor de EGF (EGFR) es uno de los muchos factores de crecimiento que impulsan la expresión de VEGF. [45]
Factor de crecimiento de hepatocitos (HGF)Estimula la motilidad celular y la secreción de proteinasas y juega un papel importante en la invasión y progresión tumoral. [46]
Factor inducible por hipoxia (HIF) -1 & # x003b1Regula al alza la expresión del gen VEGF mediante la unión del elemento de respuesta a la hipoxia a la región promotora de VEGF. [47,48,49,50,51]
Factor de crecimiento transformante (TGF) - & # x003b2Induce una fuerte producción de VEGF en células hematopoyéticas reclutadas, lo que conduce a una angiogénesis activada y una remodelación vascular. Los niveles bajos de TGF - & # x003b2 contribuyen a la angiogénesis, y los niveles altos de TGF - & # x003b2 pueden inhibir el crecimiento de CE. [52,53,54]
Interleucina (IL) -1 & # x003b2Induce la angiogénesis indirectamente activando la expresión de VEGF en las células del músculo liso. [55]
IL-3Estimula el movimiento de la CE y promueve la formación de nuevos vasos sanguíneos in vivo. También estimula la migración y proliferación de las células del músculo liso vascular. [56]
IL-6Regula la síntesis de VEGF e influye en la angiogénesis tumoral al inducir la producción de VEGF. [57]
IL-8Mejora la supervivencia, la proliferación y la producción de metaloproteinasas de la matriz de las CE, y regula la angiogénesis. [58]
Neuropilina 1 y 2Regula las interacciones entre receptores y ligandos de la familia VEGF. [59]
AdrenomedulinaPromueve la angiogénesis, protege las células de la apoptosis y la lesión vascular y afecta el tono y la permeabilidad vasculares. [60]
Factor 1 derivado de células estromales (SDF-1), una quimiocinaSinergiza con VEGF para inducir angiogénesis en tumores de cáncer de ovario humano. Además, en el cáncer de mama invasivo, el SDF-1 derivado de fibroblastos del estroma promueve la angiogénesis al reclutar precursores endoteliales derivados de la médula ósea. Desempeña un papel angiogénico a través del receptor tipo 4 del receptor de quimiocinas con motivo CXC. [61]
EndostatinaInhibe el control del ciclo celular y los genes antiapoptóticos en las CE en proliferación, inhibiendo así la angiogénesis. [62]
IntegridadMoléculas de adhesión como & # x003b16& # x003b21 y & # x003b16& # x003b24 las integrinas median la angiogénesis inducida por VEGF, que regula la adhesión de las CE a la ECM, promoviendo así la migración y supervivencia de la vasculatura tumoral. Otras integrinas (p. Ej., & # X003b1v& # x003b23, & # x003b1v& # x003b25y & # x003b15& # x003b21) también se ha demostrado que median en la angiogénesis. [63,64]
Factor derivado del epitelio pigmentario Inhibe la angiogénesis mediante la regulación a la baja de VEGF. [65]
Factor nuclear kappa-B (NF - & # x003baB)El NF - & # x003baB activado puede unirse al ADN, promover la proliferación celular, regular la apoptosis celular, promover la angiogénesis y estimular la invasión y la metástasis. [66]
Hormona tiroideaLas hormonas tiroideas tienen efectos proangiogénicos sobre las CE y las células del músculo liso vascular iniciadas por la integrina & # x003b1v& # x003b23 receptores de la superficie celular de la hormona del dominio extracelular. [67]
Metaloproteinasas de matriz (MMP)Involucrado en el proceso de angiogénesis a través de su papel proteolítico en la remodelación tisular, así como en el crecimiento de nuevos vasos sanguíneos y la liberación de factores angiogénicos secuestrados en la matriz. [68]
Monóxido de carbono (CO) endógeno y hemo oxigenasa (HO)Desempeñan un papel importante en la regulación de la tensión vascular y en la inducción de la angiogénesis, y pueden aumentar significativamente la permeabilidad vascular y el flujo sanguíneo. [69,70,71,72,73]
AngiogeninaSufre una translocación nuclear en las CE donde estimula la transcripción del ARN ribosómico y la proliferación celular. [74]
Angiopoyetina 1Activa las enzimas que degradan la matriz, incluidos los activadores del plasminógeno y las MMP, para aflojar la matriz y promover la migración de las CE. [75]
Vashohibin-1Una nueva proteína inhibidora de la angiogénesis regula la angiogénesis, inhibe la angiogénesis patológica y promueve la maduración vascular del tumor por retroalimentación negativa.Alta expresión en cáncer de hígado, cáncer de próstata, cáncer renal y cáncer colorrectal [76,77]
Permeabilidad vascularVEGF
(VEGF-A / B / C / D)
Como se ha mencionado más arriba.Sobreexpresión en la mayoría de los tumores sólidos[28,29,30]
Bradicinina (BK)Activa la NO sintasa derivada de EC, que conduce a un aumento de NO y juega un papel en el aumento de la permeabilidad vascular. [78,79]
Hydroxyprolyl3 BKComo se ha mencionado más arriba.Cáncer avanzado[80,81,82]
Óxido nítrico sintasa inducible (iNOS) y NOEl NO es un regulador vascular eficaz derivado del endotelio, que desempeña un papel importante en la permeabilidad vascular, la proliferación celular y la extravasación (efecto EPR), induciendo vasodilatación y aumentando el flujo sanguíneo. [83,84,85]
Prostaglandina E1 y I2Por lo general, está involucrado en la inflamación y el cáncer, tiene efectos similares a los del NO y puede mejorar los efectos de extravasación y EPR. [83,86]
TNF - & # x003b1Como se ha mencionado más arriba. [22,31,32,33,34,35,36]
Receptor de angiotensina tipo 2 (AGTR2)AGTR2 puede inducir vasoconstricción en tejidos sanos y aumentar la presión arterial sistémica, y es una sustancia eficaz para mejorar el flujo sanguíneo y promover la permeabilidad vascular en los tumores. [87]
IL-2Mayor permeabilidad vascular al inducir la producción de NO [76,77]
Endotelina-1 (Et-A, Et-B)La endotelina es un regulador vasoconstrictor endógeno de acción prolongada. [76,77]
Flujo sanguíneo irregularAGTR2Como se ha mencionado más arriba. [87]
CO y HO endógenosComo se ha mencionado más arriba. [69,70,71,72,73]

2.1. Angiogénesis anormal

La angiogénesis es esencial para el crecimiento y desarrollo continuo de tumores sólidos. Los vasos tumorales proporcionan oxígeno y nutrientes y eliminan los productos de desecho, proporcionan un nicho favorable para las células madre del cáncer y sirven como conducto para la diseminación metastásica de las células tumorales y la infiltración de las células inmunes. A diferencia de los vasos sanguíneos normales, los vasos sanguíneos tumorales con estructura y función anormales impiden el suministro de oxígeno adecuado y eficaz, así como de fármacos terapéuticos a las células cancerosas [88,89]. En la progresión del cáncer, la sobreexpresión de factores proangiogénicos impulsa la angiogénesis patológica. Un desequilibrio entre los factores proangiogénicos y antiangiogénicos locales puede conducir a la proliferación, migración y formación de nuevos vasos de células endoteliales (CE). Además, la cobertura de pericitos de la CE a menudo está ausente en la vasculatura del tumor. En comparación con el tejido normal con una microvasculatura organizada con un orden de ramificación regular, la organización vascular del tejido tumoral está desorganizada y carece de la jerarquía convencional. La angiogénesis anormal puede dar lugar a anomalías estructurales y funcionales del sistema vascular, que a menudo se caracterizan por una fuga tortuosa, desorganizada y excesiva [90,91]. Esta característica contribuye a la permeabilidad vascular de los fluidos y al escape de las células cancerosas metastásicas [92,93]. Además, la presión sólida generada por la proliferación de células cancerosas comprime la sangre y los vasos linfáticos del tumor, lo que deteriora aún más los flujos sanguíneos y linfáticos. Estas estructuras vasculares anormales conducen colectivamente a un microambiente tumoral anormal (TME), caracterizado por una PIF elevada, hipoxia y acidosis [88,94,95]. Una consecuencia fisiológica de estas anomalías vasculares es la heterogeneidad del flujo sanguíneo del tumor, que puede interferir con el efecto EPR y la distribución uniforme de los fármacos dentro del tumor.

Las células tumorales pueden promover la germinación de los vasos sanguíneos liberando moléculas angiogénicas que se unen a sus respectivos receptores en las células adyacentes o mediante señales paracrinas [96,97]. El factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF) parece jugar el papel más crítico en la angiogénesis fisiológica y patológica entre todas las moléculas angiogénicas conocidas. Se sobreexpresa en la mayoría de los tumores sólidos [28, 29] y puede promover la supervivencia y la proliferación de CE, aumentar la visualización de moléculas de adhesión en estas células y aumentar la permeabilidad vascular. Al regular a la baja la señalización de VEGF en tumores sólidos, la vasculatura puede volver a un estado más & # x0201cnormal & # x0201d, acompañado de una disminución de la IFP, un aumento de la oxigenación del tumor y una mejora de la permeabilidad del fármaco en estos tumores [98].

Además del VEGF, otros factores y proteínas también pueden promover la formación anormal de vasos sanguíneos tumorales. Hasta ahora, se ha encontrado que 28 factores / genes proangiogénicos median la angiogénesis tumoral [76,77], incluido el factor de crecimiento de fibroblastos (FGF), el factor inducible por hipoxia (HIF), el factor de crecimiento B derivado de plaquetas (PDGF-B) , factor de necrosis tumoral - & # x003b1 (TNF - & # x003b1), quimiocinas, integrinas y factor de crecimiento transformante - & # x003b2 (TGF - & # x003b2), así como sus receptores [76,99,100,101,102,103]. El FGF ácido y básico (FGF1 y FGF2) tiene la capacidad de inducir angiogénesis [39]. Los FGF estimulan la proliferación y migración de CE, así como la producción de colagenasa y activador del plasminógeno (PDGF), que estimulan la angiogénesis y están relacionados con el proceso de envejecimiento de la vasculatura tumoral in vivo [42,43]. TGF - & # x003b2 posee propiedades duales pro y antiangiogénicas. A niveles bajos, TGF - & # x003b2 participa en el cambio de la angiogénesis regulando al alza los factores angiogénicos y las proteinasas. En niveles altos, puede inhibir el crecimiento de CE, estimular la diferenciación y el reclutamiento de las células del músculo liso y promover la reorganización de la membrana basal [52]. Además, como factores angiogénicos eficaces, las quimiocinas pueden inducir la migración y proliferación de las CE, y tienen actividades pro o antiangiogénicas [104]. Como factor angiogénico, el HIF coopera con los inhibidores del TNF para iniciar la angiogénesis en condiciones hipóxicas [48,49,50,51]. Activa la vía de señalización y regula al alza la expresión de VEGF. Los factores de crecimiento generados por esta vía activan las vías de señalización de la proteína quinasa activada por mitógenos y la proteína quinasa B, lo que lleva a niveles aumentados de proteína HIF-1, lo que promueve la angiogénesis tumoral. Moléculas de adhesión (p. Ej., & # X003b16& # x003b21 y & # x003b16& # x003b24 integrinas) median la angiogénesis inducida por VEGF, que regula la adhesión de las CE a la ECM, promoviendo así la migración y supervivencia de la vasculatura tumoral. Otras integrinas (p. Ej., & # X003b1v& # x003b23, & # x003b1v& # x003b25y & # x003b15& # x003b21) también median en la angiogénesis [63,64].

2.2. Flujo sanguíneo irregular

En comparación con los vasos normales, los vasos tumorales recién formados son irregulares o inconsistentes [87]. Se ha informado que los vasos tumorales son insensibles al receptor de angiotensina tipo 2 (AGTR2). Además, hay un flujo intermitente (sólo un flujo en 15 & # x0201320 min) y un flujo inverso de sangre en el sitio del tumor [105,106]. Además, la sangre fluye a menudo en la dirección opuesta. El flujo sanguíneo irregular en el tumor generalmente es causado por una estructura vascular irregular. A diferencia de los tejidos normales, los factores angiogénicos en los tumores en la etapa tardía de la maduración vascular seguirán activados, lo que conducirá a anomalías vasculares, que se caracterizan por una estructura vascular irregular y heterogeneidad espacio-temporal [107]. Los vasos tumorales con estructura irregular se caracterizan por una forma vascular curva, llenado del tabique CE y daño de la membrana basal. Estos efectos conducen a una distorsión de la morfología vascular y una alta permeabilidad del espacio EC vascular [31,108,109,110]. La distorsión de los vasos sanguíneos aumenta la resistencia geométrica del flujo sanguíneo. La alta permeabilidad de los vasos sanguíneos aumenta el hematocrito de la sangre del tumor, aumentando así la viscosidad de la sangre [111]. Además, el fenómeno de la rápida proliferación de células tumorales en un espacio finito y la deposición excesiva de ECM puede conducir a un gran estrés sólido entre las células adyacentes y los componentes de la matriz. La acumulación continua de estrés sólido puede provocar la compresión de los vasos sanguíneos del tumor y la reducción del área de sección transversal y la diferencia de presión en la dirección de los vasos sanguíneos [112]. El aumento de la resistencia vascular y la viscosidad de la sangre y la compresión del estrés sólido acumulado aumentan significativamente la resistencia a la perfusión sanguínea. La mayor resistencia de los vasos tumorales a la perfusión sanguínea da como resultado una tasa de perfusión sanguínea baja y una tasa de flujo sanguíneo lento [113]. Se ha investigado el cambio en la velocidad del flujo sanguíneo en el transporte de nanopartículas a través de los vasos sanguíneos. Una simulación por computadora explicó el efecto de la velocidad del flujo sanguíneo en el transporte de nanopartículas. Los resultados mostraron que la presión en la pared del vaso y el gradiente de presión entre la pared vascular y el tejido intersticial aumentan a su vez con el aumento de la velocidad del fluido en el dominio vascular. Además, la eficiencia del transporte transvascular de las nanopartículas aumenta inicialmente y posteriormente disminuye [114]. Además, impulsada por la diferencia de presión a lo largo de la dirección vascular, la perfusión sanguínea tiene las características de convección y difusión. La convección y la difusión difieren entre los bloques tumorales y dependen del gradiente de presión local y de la resistencia al flujo debido a la heterogeneidad de los vasos sanguíneos del tumor [115].

Además de una estructura irregular, los vasos sanguíneos anormales de los tumores también presentan heterogeneidad espacio-temporal [116,117]. Esta heterogeneidad indica la distribución diferente de los vasos tumorales en varias partes del tumor o durante el período de proliferación. Esto se indica principalmente por el hecho de que la distribución de los vasos en la periferia del tumor suele ser muy rica, mientras que su extensión hacia el interior del tumor disminuye gradualmente. Por tanto, esta distribución desigual complica la entrega de nanofármacos al centro del tumor, lo que dificulta gravemente la penetración y el transporte extravascular de dichos agentes. Es de destacar que la alta heterogeneidad de los vasos tumorales en ratones experimentales y en humanos reduce los efectos antitumorales de algunas nanomedicinas [26,118].

2.3. Permeabilidad Vascular Extensa

El aumento de la permeabilidad vascular se encuentra ampliamente en los vasos tumorales discontinuos del endotelio, como los neovasos y los vasos inmaduros, así como en otros tejidos patológicos con función vascular alterada. En comparación con los vasos sanguíneos normales, los fármacos macromoleculares pueden alcanzar el estroma tumoral a través de la pared del vaso con fugas con poros grandes sin obstáculos [12]. Sin embargo, una fuga vascular excesiva puede provocar una fuga de plasma y una hemoconcentración. Esto da como resultado una estasis de flujo y un IFP elevado, lo que dificulta enormemente la extravasación de fármacos y su movimiento hacia el parénquima tumoral. Además, los coágulos de fibrina depositados promueven transitoriamente la formación de vasos sanguíneos y ECM y evitan la penetración de agentes terapéuticos antitumorales. Los medios vasculares que afectan a la permeabilidad vascular del tumor se resumen a continuación.

La bradicinina (BK) es de gran importancia para elevar la permeabilidad de los sitios inflamatorios y los tejidos tumorales, manteniendo así el crecimiento tumoral [79,81]. Se ha observado una sobreexpresión de los receptores BK en tumores sólidos, lo que da lugar a una arquitectura vascular defectuosa con grandes espacios intracelulares [119]. La quinina puede activar la sintasa de óxido nítrico (NO) derivada de EC, lo que conduce a niveles aumentados de NO, un modulador vascular derivado del endotelio eficaz y bien establecido [85,120,121]. El NO es de gran importancia en la permeabilidad vascular, la proliferación y extravasación celular (efecto EPR), la dilatación de los vasos sanguíneos y la elevación del flujo sanguíneo [83,84]. Por ejemplo, el NO generado a partir de la l -arginina bajo la acción de la NO sintasa induce la permeabilidad vascular del tumor. Se ha demostrado que la inhibición de la generación de NO puede disminuir la permeabilidad vascular, debilitando así el efecto EPR. Esto confirma además que el NO está indisolublemente ligado a la permeabilidad vascular en los tumores sólidos [84,85]. Las prostaglandinas E1 e I2 suelen estar implicadas en la inflamación y el cáncer, ejercen efectos similares a los del NO y pueden potenciar los efectos de extravasación y EPR [83,86]. En resumen, la permeabilidad vascular en los tumores a menudo está relacionada directa o indirectamente con las cininas.

Además, se ha demostrado que varios mediadores vasculares, como el factor de permeabilidad vascular (VPF), que es importante en la angiogénesis tumoral, el TNF - & # x003b1, y otros, elevan la permeabilidad vascular de los tumores [31]. La supervivencia de las CE y la permeabilidad vascular están estrechamente relacionadas con el nivel de VPF / VEGF, ya que el aumento de este nivel puede conducir a una regulación positiva de los receptores correspondientes en las CE. [34,35]. El TNF - & # x003b1, una citocina proinflamatoria multifuncional con efectos de permeabilización vascular [22], puede mejorar la fuga vascular al interrumpir la cadherina endotelial vascular de la unión de adherencia a la CE [36]. TNF - & # x003b1 puede aumentar la sensibilidad a las nanopartículas sirviendo como un agente disruptor vascular (VDA). A niveles bajos, TNF - & # x003b1 puede promover la angiogénesis; sin embargo, a concentraciones más altas, destruye los vasos tumorales y aumenta la acumulación de fármaco en los tumores [122].


2 Vasculogénesis

La evidencia clara del desarrollo de los vasos sanguíneos aparece primero fuera del embrión propiamente dicho, en el saco vitelino, a medida que se forman agregaciones focales de células mesenquimales, conocidas como islas de sangre, dentro del mesodermo adyacente al endodermo extraembirónico. Si bien los primeros estudios sugirieron que el embrión propiamente dicho se vasculariza a partir de la ramificación y el crecimiento de vasos sanguíneos extraembirónicos que a su vez se derivan de la fusión y canalización de islas de sangre, los orígenes intraembrionarios de una red vascular se reconocieron ya en 1900 cuando se determinó que las células de embriones aislados pudieron dar lugar a vasos sanguíneos. Fue en este momento cuando se describió el término angioblasto, que se refiere a las células de las que surgen todas las células endoteliales. También fue durante este período temprano cuando se postuló por primera vez la presencia del hemangioblasto, un precursor común tanto de las células endoteliales como de las células hematopoyéticas (Fig. 2). En particular, fue casi 100 años después que se confirmó la presencia del hemangioblasto [5]. La diferenciación de células precursoras embrionarias pluripotentes en células hemangioblásticas es inducida al menos en cierta medida por el factor de crecimiento de fibroblastos (FGF) a través de la señalización de la proteína quinasa C [6]. Los hemangioblastos experimentan sus primeros pasos críticos de diferenciación dentro de las islas de sangre. Las células del perímetro de las islas de sangre dan lugar a precursores de células endoteliales, mientras que las del centro constituyen precursores hematopoyéticos. Las señales moleculares que determinan el destino del hemangioblasto no están completamente aclaradas. Sin embargo, se han identificado varios genes que pueden desempeñar un papel en este evento temprano [7]. Éstos incluyen Ets-1 [8], Maleficio [9], Vezf [10], Hox [11,12], miembros de la GATA-familia, factores básicos de hélice-bucle-hélice (bHLH) [13,14], y Identificación-proteínas [15]. Los primeros marcadores comunes a los precursores endoteliales y hematopoyéticos identificados hasta ahora son CD31, CD34 y el receptor tirosina quinasa tipo 2 del factor de crecimiento de células endoteliales vasculares (VEGFR-2 o KDR / Flk1) [16]. Inactivación del VEGFR-2 gen en ratones resulta en letalidad embrionaria, con falta de desarrollo de linajes de células hematopoyéticas y endoteliales, lo que respalda la importancia crítica de este receptor en esa etapa de desarrollo [17], aunque no define los pasos que regulan la diferenciación en células endoteliales frente a hematopoyéticas.

Un origen común para los dos tipos de células de los vasos sanguíneos. Las células endoteliales y del músculo liso surgen de tipos distintos de precursores. Las células endoteliales surgen de precursores llamados angioblastos o hemangioblastos en el embrión, o de progenitores endoteliales circulantes en el adulto. Los angioblastos dan lugar a linajes arteriales y venosos. Las células del músculo liso y los pericitos, por el contrario, pueden formarse a partir de una variedad de progenitores. Estos incluyen células mesenquimales, células de la cresta neural y progenitores en el epicardio del embrión. Los progenitores en la médula ósea y su estroma, y ​​los miofibroblastos mesenquimales también dan lugar a células de músculo liso. Recientemente se ha identificado una nueva célula progenitora vascular común que da lugar a ambos tipos de células de los vasos sanguíneos. El factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF) promueve el desarrollo de células endoteliales a partir de este precursor. TGF-β1 ha estado involucrado en la diferenciación de células mesenquimales a progenitoras, que expresan el receptor de PDGF-BB. Este último estimula su desarrollo en células de músculo liso y pericitos y es responsable de su reclutamiento alrededor de los vasos nacientes. Adaptado de Ref. [114].

Un origen común para los dos tipos de células de los vasos sanguíneos. Las células endoteliales y del músculo liso surgen de tipos distintos de precursores. Las células endoteliales surgen de precursores llamados angioblastos o hemangioblastos en el embrión, o de progenitores endoteliales circulantes en el adulto. Los angioblastos dan lugar a linajes arteriales y venosos. Las células del músculo liso y los pericitos, por el contrario, pueden formarse a partir de una variedad de progenitores. Estos incluyen células mesenquimales, células de la cresta neural y progenitores en el epicardio del embrión. Los progenitores en la médula ósea y su estroma, y ​​los miofibroblastos mesenquimales también dan lugar a células de músculo liso. Recientemente se ha identificado una nueva célula progenitora vascular común que da lugar a ambos tipos de células de los vasos sanguíneos. El factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF) promueve el desarrollo de células endoteliales a partir de este precursor. TGF-β1 ha estado involucrado en la diferenciación de células mesenquimales a progenitoras, que expresan el receptor de PDGF-BB. Este último estimula su desarrollo en células de músculo liso y pericitos y es responsable de su reclutamiento alrededor de los vasos nacientes. Adaptado de Ref. [114].

A medida que la vasculatura del saco vitelino comienza a formarse aproximadamente 7,5 días después del coito (dpc) en el ratón, los angioblastos que han migrado al mesodermo paraxial se ensamblan en agregados, proliferan y posteriormente se diferencian para formar un plexo con tubos endocárdicos, lo que lleva a la formación de la región dorsal. aortae, venas cardinales y los tallos embrionarios de las arterias y venas del saco vitelino (Fig. 3). Originalmente se creía que la vasculogénesis estaba restringida al desarrollo embrionario. Sin embargo, se ha establecido que los angioblastos no solo migran intraembrionariamente, sino que pueden circular en el posparto y pueden ser reclutados para el crecimiento de vasos in situ [18-20] (fig. 4). A diferencia de las células mudadas, los angioblastos derivados de la médula ósea positivos para CD34 / VEGFR-2 / AC133 circulantes en el adulto tienen una alta tasa de proliferación [21]. La forma en que los angioblastos 'saben' dónde y cuándo iniciar la vasculogénesis es en gran parte un misterio, aunque se han encontrado una variedad de factores de crecimiento y receptores, incluido el factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF), el factor estimulante de colonias de granulocitos y monocitos (GM-CSF) y otras citocinas. implicados, ya que se ha demostrado que son capaces de reclutar angioblastos derivados de la médula ósea en los sitios de neovascularización después del nacimiento [18,22,23]. La diferenciación de angioblastos puede ser promovida por VEGF, VEGFR2 y el factor de crecimiento de fibroblastos básico (bFGF) [24-27], mientras que el receptor 1 de VEGF (VEGFR-1 Flt1) se ha determinado que suprime el compromiso de hemangioblastos [28]. Los hallazgos de que las células endoteliales todavía se desarrollan en ratones diseñados para carecer de VEGF pero que ya no se desarrollan en ausencia de VEGFR-2, sugieren que existen moléculas adicionales, que se unen a VEGFR-2, que determinan el destino de las células endoteliales. Aunque la vasculogénesis está estrechamente relacionada con la hematopoyesis, los precursores de las células hematopoyéticas definitivas surgen solo de la aorta dorsal y posteriormente pueblan el hígado, el bazo y la médula ósea. Una comprensión básica de los mecanismos moleculares que separan la hematopoyesis de la vasculogénesis no solo tendrá un impacto en las terapias angiogénicas, sino también en el tratamiento de una variedad de trastornos hematológicos.

El crecimiento vascular patológico en el adulto puede ocurrir a través de vasculogénesis (movilización de angioblastos), angiogénesis (brotación) o arteriogénesis (crecimiento colateral). Con permiso de Ref. [4].

El crecimiento vascular patológico en el adulto puede ocurrir a través de vasculogénesis (movilización de angioblastos), angiogénesis (brotación) o arteriogénesis (crecimiento colateral). Con permiso de Ref. [4].

VEGF inicia el ensamblaje de células endoteliales (EC), PDGF-BB recluta pericitos (PC) y células de músculo liso (SMC), mientras que la angiopoyetina-1 (Ang1) y TGF-β1 estabilizan el vaso naciente. La angiopoyetina-2 (Ang2) desestabiliza el vaso, lo que da como resultado una angiogénesis en presencia de estímulos angiogénicos o una regresión del vaso en ausencia de factores de supervivencia endotelial. Con permiso de Ref. [4].

VEGF inicia el ensamblaje de células endoteliales (EC), PDGF-BB recluta pericitos (PC) y células de músculo liso (SMC), mientras que la angiopoyetina-1 (Ang1) y TGF-β1 estabilizan el vaso naciente. La angiopoyetina-2 (Ang2) desestabiliza el vaso, lo que da como resultado una angiogénesis en presencia de estímulos angiogénicos o una regresión del vaso en ausencia de factores de supervivencia endotelial. Con permiso de Ref. [4].


Coagulación sanguínea: mecanismos y etapas | Sangre | Hematología | Biología

En este artículo discutiremos sobre los mecanismos y etapas de la coagulación sanguínea.

Mecanismo de Coagulación de la sangre:

La coagulación sanguínea es uno de los tres mecanismos que reducen la pérdida de sangre de los vasos sanguíneos rotos.

Los tres mecanismos son:

El músculo liso de las paredes de los vasos sanguíneos se contrae inmediatamente cuando se rompe el vaso sanguíneo. Esta respuesta reduce la pérdida de sangre durante algún tiempo, mientras que los demás mecanismos hemostáticos se activan.

ii. Formación del tapón plaquetario:

Cuando las plaquetas de la sangre encuentran un vaso sanguíneo dañado, forman un & # 8220 tapón de plaquetas & # 8221 para ayudar a cerrar la brecha en el vaso sanguíneo roto. (Las etapas clave de este proceso se denominan adhesión plaquetaria, reacción de liberación plaquetaria y agregación plaquetaria)

Después de un daño en un vaso sanguíneo, se produce un espasmo vascular para reducir la pérdida de sangre, mientras que otros mecanismos también surten efecto. Las plaquetas sanguíneas se congregan en el sitio del daño y se acumulan para formar un tapón plaquetario. Este es el comienzo del proceso de la sangre & # 8220 rompiéndose & # 8221 de su forma líquida habitual de tal manera que sus componentes juegan su propio papel en los procesos para minimizar la pérdida de sangre.

La sangre normalmente permanece en estado líquido mientras está dentro de los vasos sanguíneos, pero cuando sale de ellos, la sangre puede espesarse y formar un gel (coagulación). La coagulación de la sangre (técnicamente & # 8220 coagulación de la sangre & # 8221) es el proceso mediante el cual la sangre (líquida) se transforma en un estado sólido.

Esta coagulación de la sangre es un proceso complejo en el que intervienen muchos factores de coagulación (incluidos iones de calcio, enzimas, plaquetas, tejidos dañados) que se activan entre sí.

Las etapas de Coagulación de la sangre:

1. Formación de protrombinasa:

La protrombinasa se puede formar de dos formas, dependiendo de cuál de los dos & # 8220systems & # 8221 o & # 8220pathways & # 8221 se apliquen.

Esto se inicia cuando la sangre líquida entra en contacto con una superficie extraña, i. mi. algo que no es parte del cuerpo o

Esto se inicia cuando la sangre líquida entra en contacto con el tejido dañado.

Tanto el sistema intrínseco como el extrínseco implican interacciones entre factores de coagulación. Estos factores de coagulación tienen nombres individuales, pero a menudo se denominan mediante un conjunto estandarizado de números romanos, p. Ej. Factor VIII (factor antihemofílico), Factor IX (factor Christmas).

2. Protrombina convertida en enzima trombina:

La protrombinasa (formada en la etapa 1) convierte la protrombina, que es una proteína plasmática que se forma en el hígado, en la enzima trombina.

3. Fibrinógeno (soluble) convertido en fibrina (insoluble):

A su vez, la trombina convierte el fibrinógeno (que también es una proteína plasmática sintetizada en el hígado) en fibrina.

La fibrina es insoluble y forma los hilos que unen el coágulo.

Hay dos vías que conducen a la conversión de protrombina en trombina:

(1) La vía intrínseca y

(1) Vía intrínseca:

La vía intrínseca, que se desencadena por elementos que se encuentran dentro de la sangre en sí (intrínsecos a la sangre), se produce en la forma fluida. El daño a la pared del vaso estimula la activación de una cascada de factores de coagulación (en aras de la simplicidad, no consideraremos los factores individuales). Esta cascada da como resultado la activación del factor X.

El factor X activado es una enzima que convierte la protrombina en trombina. La trombina convierte el fibrinógeno en monómeros de fibrina, que luego se polimerizan en fibras de fibrina. Las fibras de fibirina forman una malla perdida que se estabiliza mediante enlaces cruzados creados por el factor XIII. La red estabilizada de fibras de fibrina ahora forma un coágulo que atrapa los glóbulos rojos y las plaquetas y, por lo tanto, detiene el flujo de sangre.

(2) Vía extrínseca:

La vía extrínseca se desencadena por daño tisular fuera del vaso sanguíneo. Esta vía actúa para coagular la sangre que se ha escapado del vaso hacia los tejidos. El daño al tejido estimula la activación de la tromboplastina tisular, una enzima que catalizó la activación del factor X. En este punto, las vías intrínseca y extrínseca convergen y los pasos subsiguientes son los mismos que los descritos anteriormente.

Con aterosclerosis avanzada, tome un bebé asprin todavía un día para reducir la probabilidad de ataque cardíaco y accidente cerebrovascular.

Todo el tiempo ocurren pequeños desgarros de los capilares y arteriolas. Las plaquetas son responsables de sellar rápidamente estos desgarros antes de que el proceso más lento de coagulación complete el trabajo.

En ausencia de un número adecuado de plaquetas, estas micro manchas (púrpura trombocitopénica) son visibles en la piel. La trombocitopenia puede ser aguda o crónica y tiene muchas causas. Los casos graves no tratados resultan en la muerte.

La sangre contiene alrededor de una docena de factores de coagulación. Estos factores son proteínas que existen en la sangre en un estado inactivo, pero que pueden activarse cuando los tejidos o los vasos sanguíneos están dañados.

La activación de los factores de la coagulación se produce de forma secuencial y tímida. El primer factor de la secuencia activa el segundo factor, que activa los terceros factores y así sucesivamente. Esta serie de reacciones se denomina cascada de coagulación.

La coagulación de la sangre es la transformación de sangre líquida en un gel semisólido. Los coágulos están hechos de fibras (polímeros) de una proteína llamada fibrina. Los monómeros de fibrina provienen de un precursor inactivo llamado fibrinógeno.

El cuerpo de la molécula de fibrinógeno tiene tapas en sus extremos que masifican los sitios de unión de fibrina a fibrina. Si se quitan las tapas, los monómeros de fibrina se polimerizan para formar polímeros de fibrina. Este proceso requirió trombina, la enzima que convierte el fibrinógeno en fibrina.

Este proceso también requiere calcio, que actúa como una especie de pegamento para mantener los monómeros de fibrina entre sí para formar la fibra polimérica. Las fibras de fibrina forman una malla suelta que se estabiliza mediante el factor de coagulación XIII. La red estabilizada de fibras de fibrina atrapa los eritrocitos, formando así un coágulo que detiene el flujo sanguíneo.

Fármacos anticoagulantes:

Los coágulos de sangre pueden poner en peligro la vida si se forman de manera inapropiada en lugares críticos. Los coágulos que bloquean las arterias coronarias provocan los ataques cardíacos, mientras que los coágulos que bloquean las arterias en el cerebro provocan un accidente cerebrovascular. Los medicamentos que pueden mediar en la eliminación de coágulos, & # 8220coagulantes & # 8221, se utilizan en casos de atracción cardíaca y accidente cerebrovascular para disminuir el daño causado por el coágulo.

Los medicamentos que se usan clínicamente para quitar los catres incluyen:

1. El activador tisular del plasminógeno (TPA) se clonó recientemente y ahora se produce en grandes cantidades por el higo biotecnológico Amgen. Se usa clínicamente para disolver coágulos en las arterias coronarias después de un ataque cardíaco. También se utiliza para disolver coágulos en el cerebro después de un accidente cerebrovascular.

2. La estreptoquinasa es una enzima que disuelve directamente los coágulos de sangre. Es producida por la bacteria estreptococo. Las bacterias usan estreptoquinasa para disolver los coágulos que afectan negativamente y tímidamente su crecimiento en el huésped humano. Esta enzima de disolución de coágulos es aparentemente tan eficaz como el TPA recombinante.

La estreptoquinasa cuesta $ 2 dólares por dosis, mientras que el TPA cuesta $ 2000 dólares por dosis. Basado en preocupaciones económicas, la estreptoquinasa es el fármaco de elección. Sin embargo, la estreptoquinasa no es una enzima humana, por lo tanto, el sistema inmunológico la ve como una molécula extraña que debe distorsionarse.

La respuesta inmune aumenta con el uso repetido de esto limita la eficacia del fármaco a lo largo del tiempo. El TPA, por otro lado, es una molécula de huna completa que el sistema inmunológico no destruye.


Angiogénesis y cáncer

La angiogénesis se refiere a la formación de nuevos vasos sanguíneos debido al desarrollo de capilares y venas poscapilares existentes. Hablando con precisión, la angiogénesis no es lo mismo que la vasculogénesis, que es la de novo formación de células endoteliales a partir de precursores de células del mesodermo y neovascularización. Los primeros vasos del embrión en desarrollo se forman a través de la vasculogénesis, después de lo cual la angiogénesis es responsable de la mayoría, si no de todo, el crecimiento de los vasos sanguíneos durante el desarrollo y en la enfermedad.

La angiogénesis es un proceso normal y vital en el crecimiento y desarrollo, así como en la cicatrización de heridas y en la formación de tejido de granulación. Sin embargo, también es un paso fundamental en la transición de los tumores de un estado benigno a uno maligno, lo que lleva al uso de inhibidores de la angiogénesis en el tratamiento del cáncer. La angiogénesis tumoral es un proceso extremadamente complejo que generalmente incluye pasos como la degradación de la matriz endotelial vascular, la migración de células endoteliales, la proliferación de células endoteliales, la formación de asas vasculares por la ramificación de células endoteliales y la formación de una nueva membrana basal. Debido a que la estructura neovascular y la función del tejido tumoral son anormales y la matriz vascular está incompleta, los microvasos son propensos a fugas. Por lo tanto, las células tumorales no necesitan pasar por un complicado proceso de invasión y penetrar directamente en el torrente sanguíneo y hacer metástasis. Un número creciente de estudios ha demostrado que los tumores benignos tienen una angiogénesis escasa y un crecimiento lento de los vasos sanguíneos, mientras que la mayoría de los tumores malignos tienen una angiogénesis intensiva y un crecimiento rápido. Por tanto, la angiogénesis juega un papel importante en el desarrollo y la metástasis de los tumores y es un marcador de la mayoría de los tumores malignos. La inhibición de este proceso evitará significativamente el desarrollo y la diseminación del tejido tumoral.

Mecanismos de regulación

La angiogénesis es realizada por diversas proteínas angiogénicas. p.ej integrinas y prostaglandinas, incluidos varios factores de crecimiento, como VEGF, FGF.

La familia del factor de crecimiento de fibroblastos (FGF) con sus miembros prototipo FGF-1 (FGF ácido) y FGF-2 (FGF básico) consta hasta la fecha de al menos 22 miembros conocidos. En general, los FGF estimulan una variedad de funciones celulares al unirse a los receptores de FGF de la superficie celular en presencia de proteoglicanos de heparina. La familia de receptores de FGF tiene siete miembros, y todas las proteínas receptoras son tirosina quinasas receptoras de cadena única que se activan a través de la autofosforilación inducida por un mecanismo de dimerización del receptor mediado por FGF. La activación del receptor da lugar a una cascada de transducción de señales que conduce a la activación de genes y diversas respuestas biológicas, incluida la diferenciación celular, la proliferación y la disolución de la matriz, iniciando así un proceso de actividad mitogénica fundamental para el crecimiento de células endoteliales, fibroblastos y células del músculo liso. . El FGF-1 se puede unir a los siete subtipos de receptores de FGF, lo que lo convierte en el miembro de acción más amplia de la familia FGF y un mitógeno potente para los diversos tipos de células necesarios para generar una respuesta angiogénica en los tejidos dañados, donde la regulación positiva de los receptores de FGF ocurre. El FGF-1 estimula la proliferación y diferenciación de todos los tipos de células necesarias para la construcción de un vaso arterial, incluidas las células endoteliales y las células del músculo liso, este hecho distingue al FGF-1 de otros factores de crecimiento proangiogénicos, como el factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF), que impulsa principalmente la formación de nuevos capilares.

Además del FGF-1, una de las funciones más importantes del factor de crecimiento de fibroblastos-2 (FGF-2 o bFGF) es la promoción de la proliferación de células endoteliales y la organización física de las células endoteliales en estructuras en forma de tubo, promoviendo así la angiogénesis. FGF-2 es un factor angiogénico más potente que VEGF o PDGF (factor de crecimiento derivado de plaquetas), sin embargo, es menos potente que FGF-1. Además de estimular el crecimiento de los vasos sanguíneos, aFGF (FGF-1) y bFGF (FGF-2) son actores críticos en la cicatrización de heridas. Estimulan la proliferación de fibroblastos y células endoteliales que dan lugar a la angiogénesis y el desarrollo del tejido de granulación aumentan el suministro de sangre y llenan el espacio de la herida al principio del proceso de cicatrización de la herida.

El factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF), una glicoproteína homodímera codificada por un solo gen, puede estimular directamente la migración, proliferación y división de las células endoteliales vasculares y aumentar la permeabilidad microvascular. Tiene como objetivo la mayor especificidad de las células endoteliales y el efecto mitógeno más fuerte de los mitógenos. In vitro los estudios demuestran claramente que el VEGF es un potente estimulador de la angiogénesis porque, en presencia de este factor de crecimiento, las células endoteliales en placa proliferarán y migrarán, formando finalmente estructuras tubulares que se asemejan a capilares. VEGF provoca una cascada de señalización masiva en las células endoteliales. La unión al receptor 2 de VEGF (VEGFR-2) inicia una cascada de señalización de tirosina quinasa que estimula la producción de factores que estimulan de diversas formas la permeabilidad de los vasos (eNOS, que produce NO), la proliferación / supervivencia (bFGF), la migración (ICAM / VCAM / MMP) y finalmente diferenciación en vasos sanguíneos maduros. En este proceso, VEGF se une con alta afinidad a dos receptores KDR y Flt-1 en las células endoteliales, estimula directamente la proliferación de células endoteliales vasculares e induce su migración y formación de estructuras lumen al mismo tiempo, también aumenta microvascular permeabilidad e induce proteínas plasmáticas (principalmente fibrinógeno) se extravasa y favorece la neovascularización en vivo induciendo la producción intersticial. VEGF juega un papel regulador central en la angiogénesis y la formación y es un estimulador clave de la angiogénesis.

El proceso de angiogénesis requiere interacciones entre las células endoteliales vasculares (CE) y la matriz extracelular, entre CE y CE, y entre CE y otras células circundantes.Este papel se logra mediante factores de adhesión, en los que la metaloproteinasa de la matriz (MMP) inicia la activación y migración de las células endoteliales al degradar la glicoproteína de la membrana basal y los componentes de la matriz extracelular, y la familia de las integrinas mediada por la unión a diferentes ligandos. La migración y adhesión de las células endoteliales vasculares contribuyen a la maduración y estabilidad de la neovascularización, y el factor de adhesión celular (ICAM-1) puede producir inmunosupresión y reducir la citotoxicidad de las células asesinas naturales, ayudando al tejido ectópico a escapar del sistema inmunológico del cuerpo. La muerte de las células asesinas naturales promueve la angiogénesis después de invadir el tejido ectópico.

El mecanismo de la angiogénesis es complejo y muchos factores participan y promueven la angiogénesis. El número de macrófagos en el líquido peritoneal de las transiciones epiteliales mesenquimales (EMT) aumenta significativamente. Los macrófagos secretan TNF-α e IL-8, y luego pueden promover la proliferación de células endoteliales vasculares. Además, factor de crecimiento transformante-β (TGF-β), factor de crecimiento de células endoteliales derivado de plaquetas (PD-ECGF), heparanasa, angiogenina (angs), osteogenina (OPN), ciclooxigenasa (COX-2), factor inducible por hipoxia - 1, Laminina (LN), factor de crecimiento placentario (PLGF), Survivina, eritropoyetina (Epo) están involucrados en la formación de vasos sanguíneos EMT.

La endostatina (ENS) es un fragmento C-terminal del colágeno XVIII que inhibe específicamente la proliferación de células endoteliales y promueve la apoptosis. Inhibe factores angiogénicos como VEGF y bFGF y sus efectos biológicos, y también puede interactuar con las MMP y las integrinas ανβ3, Ανβ5. Además, ENS puede inhibir la migración y adhesión de células endoteliales y macrófagos. Tiene una gran capacidad para inhibir la neovascularización y juega un papel importante en la regulación de la angiogénesis tumoral.

En la angiogénesis, existe una sustancia que inhibe el crecimiento de nuevos vasos sanguíneos, se llama inhibidor de la angiogénesis. Incluyen: Angiostina, puede inhibir selectivamente la proliferación de células endoteliales Trombospondina-1 (TSP-1), inhibe la angiogénesis inducida por VEGF o bFGF al interactuar con la matriz celular y es inhibidores tisulares de metaloproteinasas (TIMP) dependientes de la concentración, puede inhiben la angiogénesis mediante la formación de complejos con MMP, inhibiendo así la angiogénesis. Además, el factor plaquetario-4 (PF-4), el interferón-α (IFN-α), la interleucina-13, la interleucina-4, la interleucina-10 y el inhibidor del activador del plasminógeno inhiben el proceso de formación de vasos sanguíneos.

Significación clínica

Las células cancerosas son células que han perdido su capacidad de dividirse de forma controlada. Un tumor maligno consiste en una población de células cancerosas en rápido crecimiento y división que acumula mutaciones progresivamente. Sin embargo, los tumores necesitan un suministro de sangre dedicado para proporcionar el oxígeno y otros nutrientes esenciales que necesitan para crecer más allá de cierto tamaño. Por lo tanto, la angiogénesis es esencial para el crecimiento y la metástasis del tumor, el control de la angiogénesis asociada al tumor es una táctica prometedora para limitar la progresión del cáncer. La angiogénesis tumoral es un proceso extremadamente complejo que generalmente incluye pasos como la degradación de la matriz endotelial vascular, la migración de células endoteliales, la proliferación de células endoteliales, la formación de asas vasculares por la ramificación de células endoteliales y la formación de una nueva membrana basal. La aparición de angiogénesis tumoral depende de un efecto de interacción. Por un lado, las células tumorales liberan factores angiogénicos para activar las células endoteliales vasculares y promover la proliferación y migración de las células endoteliales. Por otro lado, las células endoteliales también secretan ciertos factores de crecimiento angiogénicos para estimular el crecimiento de las células tumorales. La interacción entre las células tumorales y las células endoteliales atraviesa todo el proceso de angiogénesis tumoral de principio a fin. En general, los capilares derivados de tumores se forman extendiendo y expandiendo sobre la base de los vasos sanguíneos originales, y el proceso es similar al proceso típico de curación de heridas y embriogénesis. Estas neovascularizaciones proporcionan nutrientes para la infiltración continua del tumor primario en crecimiento. A su vez, las células tumorales secretan una variedad de sustancias durante el crecimiento para acelerar la formación de capilares derivados del tumor.

Similar a la angiogénesis común, FGF, VEGF y otros estimuladores angiogénicos también son necesarios para la angiogénesis tumoral asociada. Por ejemplo, VEGF puede promover la proliferación de células endoteliales, aumentar la permeabilidad vascular y promover la expresión del activador del plasminógeno (PA) y del inhibidor del activador del plasminógeno (PAI), colagenasa intersticial y trombina en las células endoteliales y extravasación de fibrina plasmática, lo que lleva a la deposición de celulosa en el estroma tumoral y promoción de macrófagos Las células, los fibroblastos y las células endoteliales crecen, lo que conduce a la angiogénesis tumoral y desempeñan un papel importante en el crecimiento tumoral. La mayor parte del VEGF secretado por las células tumorales se concentra alrededor de los vasos sanguíneos del tumor. La respuesta de los vasos sanguíneos tumorales al VEGF fue mayor que la de los vasos sanguíneos normales, lo que indica que el VEGF está estrechamente relacionado con la angiogénesis tumoral. En experimentos de transfección celular, las células de melanoma Me157 transfectadas con el gen VEGF pueden secretar una gran cantidad de VEGF. Después de la inoculación subcutánea en ratones desnudos, aparece una gran cantidad de vasos sanguíneos en el tejido tumoral, y pasan radialmente a través del tumor por radial, lo que sugiere que no solo afecta el número de angiogénesis del tumor, sino que también afecta la estructura de la angiogénesis. . Por lo tanto, los ensayos clínicos con angiogénesis tumoral como objetivo han atraído mucha atención. Encontrar una forma que pueda curar el tumor mediante la inhibición de la angiogénesis tumoral es una dirección de investigación candente en la terapia del cáncer.


Fármaco dirigido contra el cáncer combinado con quimioterapia de dosis baja reduce los tumores y retrasa el cáncer de ovario

El estudio, presentado en la 41ª reunión anual de la Sociedad Estadounidense de Oncología Clínica (ASCO) en Orlando, Florida, evaluó a 29 pacientes con cáncer de ovario recurrente después de haberse sometido a hasta tres rondas de tratamiento con quimioterapia estándar. Todos los pacientes recibieron una dosis baja de quimioterapia diaria (en forma de píldora) y bevacizumab por infusión intravenosa. Los investigadores encontraron que casi la mitad de las pacientes no presentaron progresión de su cáncer de ovario seis meses después de recibir tratamiento con bevacizumab y quimioterapia oral en dosis bajas. Además, los tumores se redujeron en más del 20 por ciento de los pacientes.

"Nuestros primeros resultados sugieren que este fármaco dirigido funcionó eficazmente con una forma de pastilla de quimioterapia de dosis baja para reducir o detener el crecimiento del cáncer de ovario en pacientes cuya enfermedad había reaparecido después de un tratamiento previo con quimioterapia estándar", dijo García.

Bevacizumab es el nombre común de Avastin TM, un anticuerpo monoclonal que ataca y detiene la función de una sustancia producida por células llamada factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF), que estimula el crecimiento de los vasos sanguíneos que nutren los tumores cancerosos y los hacen crecer. - un proceso llamado angiogénesis. Actualmente, el bevacizumab ha sido aprobado por la Administración de Alimentos y Medicamentos como tratamiento de primera línea en combinación con quimioterapia basada en 5-FU para pacientes con cáncer de colon que se ha diseminado a otras partes del cuerpo.

La ciclofosfamida es un medicamento de quimioterapia estándar que se administra por vía intravenosa o en forma de pastilla que se usa para tratar varios tipos de cáncer, a menudo en combinación con otros medicamentos. Pero los investigadores de laboratorio han descubierto que cuando el fármaco se administra en una dosis más baja durante un período prolongado, la dosis es demasiado baja para destruir las células cancerosas, pero puede detener el crecimiento de los vasos sanguíneos que alimentan al tumor.

"Nuestra teoría era que si podíamos combinar un agente anti-angiogénesis conocido con una dosis más baja de quimioterapia de manera prolongada, los dos trabajarían sinérgicamente para cortar el suministro de sangre que alimenta el tumor de cáncer de ovario y detener el crecimiento del cáncer". García dijo.

Para averiguar si el bevacizumab y la ciclofosfamida reducirían los tumores y aumentarían la supervivencia de las pacientes con cáncer de ovario recurrente, los investigadores evaluaron a 29 pacientes cuya enfermedad había recurrido después de al menos una y hasta tres rondas previas de tratamiento con quimioterapia estándar. Los pacientes recibieron 50 miligramos de una pastilla de ciclofosfamida al día y 10 miligramos por kilogramo de bevacizumab por vía intravenosa una vez a la semana durante las primeras tres semanas del estudio y cada dos semanas a partir de entonces.

Los investigadores encontraron que el 47 por ciento de los pacientes no había progresado en su enfermedad a los seis meses de tratamiento con bevacizumab y ciclofosfamida. Además, los tumores de cáncer de ovario se redujeron en el 21 por ciento de las pacientes, mientras que el 59 por ciento logró una enfermedad estable, o cáncer de ovario que no progresó ni disminuyó durante al menos dos meses de tratamiento. Los efectos secundarios fueron similares a los informados en otros estudios de bevacizumab, incluida la presión arterial alta, la fatiga y los coágulos de sangre.

"Nuestro estudio sugiere que un medicamento contra el cáncer contra la angiogénesis usado en combinación con una dosis baja de quimioterapia, que se tomó convenientemente en forma de píldora, redujo los tumores y puede retrasar la progresión de la enfermedad en un número significativo de pacientes con cáncer de ovario recurrente. "Dijo García. "Estos primeros resultados pueden conducir a un nuevo uso de este anticuerpo monoclonal en el tratamiento del cáncer de ovario".

El cáncer de ovario es el séptimo cáncer más común entre las mujeres y ocupa el cuarto lugar como causa de muerte por cáncer en las mujeres. La Sociedad Estadounidense del Cáncer estima que alrededor de 22,220 mujeres en los Estados Unidos desarrollarán cáncer de ovario este año y que alrededor de 16,210 mujeres morirán a causa de la enfermedad. Por lo general, el cáncer de ovario se trata con cirugía, quimioterapia y radiación, según la extensión del cáncer. Hasta la fecha, no se dispone de una prueba de detección estandarizada para detectar el cáncer de ovario.

Este estudio fue patrocinado por el Instituto Nacional del Cáncer en virtud de su Acuerdo de Investigación y Desarrollo Cooperativo con Genentech para el desarrollo de bevacizumab. Se realizó como parte del Consorcio del Cáncer de California, un grupo colaborativo financiado por el Instituto Nacional del Cáncer (NCI) que consta del Centro Médico Cedars-Sinai Hospital Princess Margaret de la Universidad de Chicago, la Universidad de California, Davis City of Hope y el Centro de Cáncer Norris de la Universidad del Sur de California. .

Uno de los cinco hospitales de California cuyas enfermeras han sido honradas con la prestigiosa designación Magnet, Cedars-Sinai Medical Center es uno de los centros médicos académicos sin fines de lucro más grandes del oeste de los Estados Unidos. Durante 17 años consecutivos, ha sido nombrado el hospital más preferido de Los Ángeles para todas las necesidades de salud en una encuesta independiente de los residentes del área. Cedars-Sinai es reconocida internacionalmente por sus capacidades de diagnóstico y tratamiento y su amplio espectro de programas y servicios, así como por sus avances en investigación biomédica y educación médica superlativa. Se encuentra entre los 10 mejores hospitales no universitarios de la nación por sus actividades de investigación y recientemente fue acreditado por completo por la Asociación para la Acreditación de Programas de Protección de Investigación Humana, Inc. (AAHRPP). Hay información adicional disponible en www.csmc.edu.

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Materiales y métodos

Productos químicos y líneas celulares.

SU11248, Sunitinib, se adquirió de LC Laboratories (Woburn, MA). La proteína VEGF humana se obtuvo de PROSPECT-TANY TECHNOGENE LTD., (Israel). La hormona 17-beta-estradiol se adquirió de Sigma (St. Louis, MO). Las células de cáncer de mama de ratón (E0771), que se aislaron originalmente de un ratón inmunocompetente C57BL / 6, fueron proporcionadas por el Dr. Sirotnak FM en el Memorial Sloan Kettering Cancer Center, Nueva York, NY. Se adquirieron 7 células endoteliales de la vena umbilical humana (HUVEC), células de músculo liso aórtico humano (HASMC), células de cáncer de mama positivo para receptor de estrógeno humano (MCF-7) y células de cáncer de mama negativo para receptor de estrógeno humano (MDA-MB-231) de la American Type Culture Collection (Rockville, MD).

Protocolos animales.

Los protocolos se llevaron a cabo de acuerdo con las pautas para el cuidado y uso de animales de laboratorio implementadas por los Institutos Nacionales de Salud y las Pautas de la Ley de Bienestar Animal, y fueron aprobados por el Comité Institucional de Cuidado y Uso de Animales del Centro Médico de la Universidad de Mississippi. Se adquirieron ratones hembra C57BL / 6 de siete semanas de edad en Jackson Laboratory (Bar Harbor, Maine). Se permitió que los ratones se aclimataran durante 1 semana con una dieta de pienso estándar (Teklad, Harlan Sprague Dawley Indianapolis, IN) y agua del grifo antes de comenzar el experimento. Las hembras de ratón de ocho semanas (n = 8) recibieron SU11248 10 mg / 50 ml en agua para beber (destilada) durante 4 semanas, y el grupo de control (n = 8) recibió solo agua para beber (destilada) con regularidad. Cada ratón (20 g) bebió de 2 a 4 ml de agua al día. Por tanto, los ratones consumieron de 20 a 40 mg / kg / día de SU11248. Durante la segunda semana, todos los ratones se inocularon por vía subcutánea en la almohadilla izquierda de la cuarta glándula mamaria con 100 & # x000b5l de 106 células E0771 suspendidas en solución salina tamponada con fosfato, usando una aguja de calibre 23. Se controló semanalmente el peso corporal de los ratones. El tamaño del tumor se controló cada dos días en dos dimensiones perpendiculares paralelas a la superficie de los ratones usando calibradores de dial. Al final del experimento, los tumores se extrajeron y se pesaron para su análisis. Luego, se colocaron en nitrógeno líquido para extracción de proteína total y extracción de proteína nuclear o formalina neutra al 10% para estudio inmunohistológico.

Análisis morfométrico de la angiogénesis tumoral.

La cuantificación de vasos sanguíneos en tejidos tumorales se determinó mediante nuestros métodos informados anteriormente. 6, 9 Se fijaron criosecciones delgadas consecutivas (5 & # x000b5m) de tejidos tumorales incluidos en el compuesto OCT (Sakura Finetek, Torrance, CA) en acetona a 4 & # x000b0C durante 10 min. Después de lavar en solución salina tamponada con fosfato (PBS), las secciones se trataron con 3% de H2O2 durante 10 minutos para bloquear la actividad de la peroxidasa endógena, y luego se bloquea con suero de conejo normal. A continuación, las secciones se lavaron en PBS y se incubaron con anticuerpo monoclonal de rata anti-CD31 de ratón (PECAM-1) (BD Pharmingen, San Diego, CA) a una dilución 1: 200 durante la noche a 4 & # x000b0C. Los controles negativos se incubaron con IgG de suero de rata a la misma dilución. Todas las secciones se lavaron en PBS que contenía 0,05% de Tween-20 y luego se incubaron con un segundo anticuerpo, IgG anti-rata de ratón (Vector Laboratory, Burlingame, CA), a una dilución 1: 200 durante 1 hora a temperatura ambiente, nuevamente. seguido de lavado con PBS que contiene 0,05% de Tween-20. Las secciones se incubaron en una dilución 1: 400 de Extravadin Peroxidase (Sigma, St. Louis, MO) durante 30 min. Después de lavar en PBS que contenía Tween-20 al 0,05%, las secciones se incubaron en sustrato de peroxidasa (Vector laboratorios, Burlingame, CA) durante 5 min. Las secciones se lavaron en PBS que contenía 0,05% de Tween-20 y se contratiñeron con hematoxilina. Se indicó una reacción positiva mediante tinción marrón. Los vasos microvasculares se cuantificaron mediante recuento manual con microscopía óptica. Un campo microscópico (0,7884 mm 2) se definió mediante una rejilla atada en el ocular. Se tomaron aleatoriamente al menos 20 campos microscópicos de cada tumor para su análisis. Se consideró que cualquier célula endotelial o grupo de células que mostrara tinción de anticuerpos y claramente separada de un grupo adyacente era un único microvaso contable. El valor de la densidad microvascular media (AMVD) se determinó calculando la media de los recuentos vasculares por mm 2 obtenidos en los campos microscópicos para cada muestra de tumor.

Reacción en cadena de la polimerasa con transcripción inversa.

El aislamiento de ARN total de células E0771 cultivadas se realizó como se describió previamente. 9 El ARNm de VEGFR1 y el ARNm de VEGFR2 de las células E0771 se determinaron mediante RT-PCR como se describió anteriormente. 10 La reacción en cadena de la polimerasa con transcriptasa inversa (RT-PCR) se realizó con un kit de síntesis de cDNA iScript de Bio-Rad siguiendo las instrucciones del fabricante: 2 & # x000b5g de ARN total, 4 & # x000b5l 5X mezcla de reacción iScript, 1 & # x000b5l iScript transcriptasa inversa en un volumen total de 20 & # x000b5l. La mezcla de RT se incubó a 25 ° C durante 5 min, 42 ° C durante 30 min y 4 ° C durante 5 min en un termociclador programable (Bio-Rad). La mezcla de PCR incluía 5 & # x000b5l de la mezcla de RT, 2 & # x000b5l de cebador con sentido, 2 & # x000b5l de cebador antisentido y 25 & # x000b5l de mezcla Taq en un volumen total de 50 & # x000b5l. Las amplificaciones se realizaron de la siguiente manera: 40 ciclos a 94 ° C durante 5 min / 94 ° C, 0,5 min 60 ° C durante 0,5 min y 72 ° C durante 1 min / 72 ° C, 7 min, luego 4 ° C. Se utilizaron las siguientes secuencias de cebadores: VEGFR1 sentido 5 & # x02032-GAG GAG GAT GAG GGT GTC TAT AGG T-3 & # x02032 y antisentido 5 & # x02032-GTG ATC AGC TCC AGG TTT GAC TT-3 & # x02032 (115 pb) VEGFR2 sentido 5 & ​​# x02032-GCC CTG CTG TGG TCT CAC TAC-3 & # x02032 y antisentido 5 & # x02032-CAA AGC ATT GCC CAT TCG AT-3 & # x02032 (115 pb). El ARNm de VEGFR1 y el ARNm de VEGFR2 se observaron ejecutando los productos de RT-PCR en gel de agarosa al 2% con tampón TAE.

Ensayo de proliferación.

Las células E0771, las células MCF-7 y las células MDA-MB-231 se mantuvieron como cultivos en monocapa en Medio RPMI 1640 (GIBCO) suplementado con FBS al 10% (HyClone), 100 U / ml de penicilina, 100 & # x000b5g / ml de estreptomicina y 0,25 & # x000b5g / ml de anfotericina B y se incubó a 37 & # x000b0C en un 5% de CO humidificado2/ atmósfera inyectada de aire. Las líneas celulares de células endoteliales de la vena umbilical humana (HUVEC) y células del músculo liso aórtico humano (HASMC) se cultivaron usando medio M199 (GIBCO) suplementado con FBS al 10% (HyClone), 100 U / ml de penicilina, 100 & # x000b5g / ml estreptomicina y 0,25 & # x000b5g / ml de anfotericina B y se incubaron a 37 & # x000b0C en un 5% de CO humidificado2/ atmósfera inyectada de aire. Cuando la monocapa alcanzó aproximadamente el 80% de confluencia, las células se lavaron con PBS y se incubaron con medio fresco con FBS al 10% en ausencia (control de vehículo) y presencia de VEGF (10 ng / ml), VEGF más SU11248 (10 & # x000b5mol / L) o SU11248 (5 y 10 & # x000b5mol / L) durante 18 hrs. Se usó el ensayo de incorporación de 3H-timidina para determinar la proliferación celular durante las últimas 6 horas de incubación como se describió previamente. 11

Ensayo de migración.

La migración se determinó utilizando la cámara de invasión BD BioCoat Matrigel (BD Bioscience Discovery Labware, Sedford, MA) como se describe en un estudio anterior, en el que solo las células invasoras digirieron la matriz y se movieron a través de la membrana del inserto. En ausencia de SU11248 (control) y la presencia de SU11248 (10 & # x000b5mol / L) y el medio con FBS al 10% se añadió a la parte inferior del pocillo. Después de la incubación durante la noche a 37 & # x000b0C y 5% de CO2, las células de la superficie superior del inserto se eliminaron con un hisopo de algodón.Las células migradas en la superficie inferior del inserto se tiñeron usando DiffQuit (Dada Behring, D & # x000fcdinen, Suiza). Se tomaron las imágenes de las células migradas y se contó el número de células migradas utilizando un microscopio (Leica, Alemania) en un objetivo de 20x.

Mediciones de los niveles de proteínas de VEGF y VEGFR1 mediante ELISA.

Los niveles de proteína de VEGF y receptor-1 de VEGF en células cultivadas MCF-7 y MDA-MB-231 se determinaron usando kits de ELISA VEGF y VEGF Flt-1 de ratón (R & # x00026D Systems, Minneapolis, MN), de acuerdo con las instrucciones del fabricante. Las proteínas totales de las células cultivadas MCF-7 o MDA-MB-231 se extrajeron utilizando reactivos de extracción citoplásmica NE-PER (Pierce, Rockford, IL), de acuerdo con el protocolo del fabricante. Los niveles de proteína de VEGF y VEGFR1 (Flt-1) en células MCF-7 y MDA-MB-231 cultivadas se determinaron en ausencia (control de vehículo) y presencia de 17beta-estradiol (5 nmol / L) durante 18 horas. La concentración de proteína total de las células cultivadas MCF-7 y MDA-MB-231 se determinó usando un ensayo de proteínas Bio-Rad (Bio-Rad Laboratories, Hercules, CA). Las concentraciones de proteína de VEGF y VEGFR1 se normalizaron y expresaron como pictogramas por miligramo de proteína celular total.

Análisis estadístico.

Todas las determinaciones se realizaron en conjuntos duplicados. Donde se indique, los datos se presentan como media & # x000b1 SE. Las diferencias estadísticamente significativas en los valores medios entre los dos grupos se probaron mediante una prueba t de Student para datos no apareados. Se utilizó ANOVA para analizar las diferencias entre dos grupos con comparaciones múltiples. Se consideró estadísticamente significativo un valor de p & # x0003c 0,05. Todos los cálculos estadísticos se realizaron utilizando el software SPSS (SPSS Inc., Chicago, IL).