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2.2: Hidrocarburos - Biología

2.2: Hidrocarburos - Biología


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Los hidrocarburos son moléculas orgánicas que constan exclusiva o principalmente de átomos de carbono e hidrógeno. Vienen en dos sabores: (1) hidrocarburos alifáticos que consisten en cadenas lineales de átomos de carbono y (2) hidrocarburos aromáticos que consisten en anillos cerrados de átomos de carbono.

Hidrocarburos alifáticos

El más simple es el metano, CH4. El siguiente es el etano, C2H6.

Los ácidos grasos de las grasas son hidrocarburos alifáticos. Si una cadena contiene todos los átomos de hidrógeno que puede, se dice que la molécula es saturado. Los ácidos grasos en tristearin están todos saturados.

Si dos átomos de carbono adyacentes pierden cada uno un átomo de hidrógeno, se forma un doble enlace entre ellos. Se dice que tal molécula es insaturado.

Ejemplo: etileno H2C = CH2

Los ácidos grasos de la trilinoleína y el ácido linolénico son ejemplos de ácidos grasos insaturados.

Hidrocarbonos aromáticos

El componente básico de los hidrocarburos aromáticos es el anillo de benceno. La disposición de los átomos se muestra a la izquierda. La versión del centro se usa a menudo para simplificar diagramas de estructuras moleculares. Los tres dobles enlaces no están restringidos a las posiciones que se muestran, sino que pueden pasar libremente por el anillo. Esto a veces se indica dibujando el anillo de benceno como está en el extremo derecho.

Algunos ejemplos de moléculas biológicas que incorporan el anillo de benceno:

  • los aminoácidos tirosina y fenilalanina
  • colesterol y sus diversos derivados, como las hormonas sexuales: estrógenos y testosterona
  • el herbicida 2,4-D

El carotenoide betacaroteno, es un hidrocarburo que tiene porciones tanto alifáticas como aromáticas.


Clasificación de hidrocarburos | Hidrocarburos alifáticos frente a aromáticos, saturados frente a insaturados

Hidrocarburosmoléculas orgánicas que constan únicamente de átomos de carbono y átomos de hidrógeno conectados por enlaces covalentes.

Hay dos clases principales de hidrocarburos: hidrocarburos alifáticos y aromáticos.

El término general hidrocarburo alifático se refiere a un compuesto que tiene una estructura basada en cadenas lineales o ramificadas o anillos de átomos de carbono.

Los hidrocarburos alifáticos se dividen en cuatro familias:

  1. alcanos,
  2. alquenos,
  3. alquinos,
  4. hidrocarburos cíclicos (cicloalcanos, cicloalquenos, etc.).

Tipos de hidrocarburos


Contenido

El derrame del oleoducto Sun Oil en Ambler, Pensilvania, estimuló el primer uso comercial de la biorremediación in situ en 1972 para eliminar los hidrocarburos de los sitios contaminados. [6] Richard Raymond presentó una patente en 1974, Recuperación de aguas subterráneas contaminadas con hidrocarburos, que sentó las bases para la comercialización de la biorremediación in situ. [6]

Edición acelerada

La biorremediación acelerada in situ se define cuando un microorganismo específico es el objetivo del crecimiento mediante la aplicación de nutrientes o un donante de electrones al sitio contaminado. Dentro del metabolismo aeróbico, el nutriente agregado al suelo puede ser únicamente oxígeno. La biorremediación anaeróbica in situ a menudo requiere una variedad de donantes o aceptores de electrones, como benzoato y lactato. [7] Además de los nutrientes, los microorganismos también pueden introducirse directamente en el sitio dentro de la biorremediación acelerada in situ. [8] La adición de microorganismos extraños a un sitio se denomina bioaumentación y se utiliza cuando un microorganismo en particular es eficaz para degradar el contaminante en el sitio y no se encuentra de forma natural o en una población lo suficientemente alta para ser eficaz. [7] La ​​biorremediación in situ acelerada se utiliza cuando la población deseada de microorganismos dentro de un sitio no está presente de forma natural en un nivel suficiente para degradar eficazmente los contaminantes. También se usa cuando los nutrientes requeridos dentro del sitio no están en una concentración suficiente para soportar el crecimiento o no están disponibles. [7]

Proceso de Raymond Editar

El Proceso Raymond es un tipo de biorremediación in situ acelerada que fue desarrollado por Richard Raymond e implica la introducción de nutrientes y aceptores de electrones en un sitio contaminado. [9] Este proceso se utiliza principalmente para tratar aguas subterráneas contaminadas. En el proceso de Raymond se crea un sistema de bucle. El agua subterránea contaminada de aguas abajo del flujo de agua subterránea se bombea a la superficie y se le infunden nutrientes y un donante de electrones, a menudo oxígeno. Esta agua tratada luego se bombea hacia abajo por debajo del nivel freático corriente arriba de donde se tomó originalmente. Este proceso introduce nutrientes y donantes de electrones en el sitio permitiendo el crecimiento de una determinada población microbiana. [9]

Inyección de oxígeno Editar

En sitios contaminados donde el metabolismo microbiano deseado es aeróbico, la introducción de oxígeno en el sitio puede usarse para aumentar la población de microorganismos objetivo. [10] La inyección de oxígeno puede ocurrir a través de una variedad de procesos. El oxígeno se puede inyectar en el subsuelo a través de pozos de inyección. También se puede introducir a través de una galería de inyección. La presencia de oxígeno dentro de un sitio es a menudo el factor limitante al determinar el marco de tiempo y la eficacia de un proceso de biorremediación in situ propuesto.

Inyección de ozono Editar

El ozono inyectado en el subsuelo también puede ser un medio para introducir oxígeno en un sitio contaminado. [10] A pesar de ser un agente oxidante fuerte y potencialmente tener un efecto tóxico en las poblaciones microbianas del subsuelo, el ozono puede ser un medio eficiente de esparcir oxígeno por todo un sitio debido a su alta solubilidad. [10] Dentro de los veinte minutos posteriores a la inyección en el subsuelo, el cincuenta por ciento del ozono se habrá descompuesto en oxígeno. [10] El ozono se introduce comúnmente en el suelo en estado disuelto o gaseoso. [10]

Biorremediación anaeróbica acelerada in situ Editar

Dentro de la biorremediación anaeróbica acelerada in situ, los donantes y aceptores de electrones se introducen en un sitio contaminado para aumentar la población de microorganismos anaeróbicos. [9]

Atenuación natural supervisada (MNA) Editar

La atenuación natural supervisada es la biorremediación in situ que se produce con poca o ninguna intervención humana. [11] Este proceso se basa en las poblaciones microbianas naturales sostenidas dentro de los sitios contaminados para reducir con el tiempo los contaminantes al nivel deseado. [11] Durante la atenuación natural monitoreada, el sitio es monitoreado para rastrear el progreso de la biorremediación. [11] La atenuación natural supervisada se utiliza en sitios donde la fuente de contaminación ya no está presente, a menudo después de que se han llevado a cabo otros tipos más activos de biorremediación in situ. [11]

Degradación de hidrocarburos Editar

En el suelo se encuentran de forma natural poblaciones microbianas que utilizan hidrocarburos como fuente de energía y carbono. [9] Hasta el veinte por ciento de las poblaciones microbianas del suelo tienen la capacidad de metabolizar hidrocarburos. [9] Estas poblaciones pueden, a través de una atenuación monitorizada natural o acelerada, ser utilizadas para neutralizar los contaminantes de hidrocarburos del suelo. El modo metabólico de remediación de hidrocarburos es principalmente aeróbico. [9] Los productos finales de la remediación de hidrocarburos son el dióxido de carbono y el agua. [9] Los hidrocarburos varían en facilidad de degradación según su estructura. Los carbonos alifáticos de cadena larga son los que se degradan con mayor eficacia. Los hidrocarburos alifáticos cuaternarios, ramificados y de cadena corta se degradan con menor eficacia. [9] La degradación de los alquenos depende de la saturación de la cadena y los alquenos saturados se degradan más fácilmente. [9] Dentro del suelo hay una gran cantidad de microbios con la capacidad de metabolizar hidrocarburos aromáticos. Los hidrocarburos aromáticos también son susceptibles de degradarse a través del metabolismo anaeróbico. [9] El metabolismo de los hidrocarburos es una faceta importante de la biorremediación in situ debido a la gravedad de los derrames de petróleo en todo el mundo. La susceptibilidad de los carbonos aromáticos polinucleares a la degradación está relacionada con el número de anillos aromáticos dentro del compuesto. [9] Los compuestos con dos o tres anillos se degradan a un ritmo eficaz, los compuestos que poseen cuatro o más anillos pueden ser más resistentes a los esfuerzos de biorremediación. [9] La degradación de los carbonos aromáticos polinucleares con menos de cuatro anillos se logra mediante varios microbios aeróbicos presentes en el suelo. Para compuestos más grandes, el único modo metabólico que ha demostrado ser efectivo es el cometabolismo. [9] El género de hongos Phanerochaete en condiciones anaeróbicas tiene especies con la capacidad de metabolizar algunos carbonos aromáticos polinucleares utilizando una enzima peroxidasa. [9] [12]

Compuestos clorados Editar

Compuestos alifáticos clorados Editar

Existe una variedad de modos metabólicos capaces de degradar compuestos alifáticos clorados. La reducción anaeróbica, la oxidación del compuesto y el cometabolismo en condiciones aeróbicas son los tres modos metabólicos principales utilizados por los microorganismos para degradar los compuestos alifáticos clorados. [9] Los organismos que pueden metabolizar fácilmente compuestos alifáticos clorados no son comunes en el medio ambiente. [9] Uno y dos carbonos que tienen poca cloración son los compuestos más eficazmente metabolizados por las poblaciones microbianas del suelo. [9] La degradación de compuestos alifáticos clorados se realiza con mayor frecuencia a través del cometabolismo. [9]

Hidrocarburos aromáticos clorados Editar

Los hidrocarburos aromáticos clorados son resistentes a la biorremediación y muchos microorganismos carecen de la capacidad de degradar los compuestos. Los hidrocarburos aromáticos clorados se degradan con mayor frecuencia mediante un proceso de decloración reductora en condiciones anaeróbicas. [9] Los bifenilos policlorados (PCB) se degradan principalmente a través del cometabolismo. También hay algunos hongos que también pueden degradar los compuestos. Los estudios muestran un aumento en la degradación de los PCB cuando se agrega bifenilo al sitio debido a los efectos cometabólicos que las enzimas utilizadas para degradar el bifenilo tienen en los PCB. [9]

Debido a la biorremediación in situ que tiene lugar en el sitio de contaminación, existe un riesgo menor de contaminación cruzada en contraposición a la biorremediación ex situ donde el material contaminado se transporta a otros sitios. La biorremediación in situ también puede tener costos más bajos y una mayor tasa de descontaminación que la biorremediación ex situ.


Anillos de hidrocarburos

Hasta ahora, los hidrocarburos que hemos discutido han sido hidrocarburos alifáticos, que consisten en cadenas lineales de átomos de carbono. Otro tipo de hidrocarburo, los hidrocarburos aromáticos, consta de anillos cerrados de átomos de carbono. Las estructuras de anillo se encuentran en los hidrocarburos, a veces con la presencia de dobles enlaces, que se pueden ver comparando la estructura del ciclohexano con el benceno en la Figura. Los ejemplos de moléculas biológicas que incorporan el anillo de benceno incluyen algunos aminoácidos y colesterol y sus derivados, incluidas las hormonas estrógeno y testosterona. El anillo de benceno también se encuentra en el herbicida 2,4-D. El benceno es un componente natural del petróleo crudo y ha sido clasificado como carcinógeno. Algunos hidrocarburos tienen porciones tanto alifáticas como aromáticas. El betacaroteno es un ejemplo de dicho hidrocarburo.

El carbono puede formar anillos de cinco y seis miembros. Los enlaces simples o dobles pueden conectar los carbonos en el anillo y el nitrógeno puede sustituir al carbono.


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Tiempo: 3 horas.
Puntuaciones máximas: 70

Unidad de división de marcas sabia

Unidad Título Período Marcas
6. Reproducción 30 14
7. Genética y Evolución 40 18
8. Biología y Bienestar Humano 30 14
9. Biotecnología y sus aplicaciones 30 10
10. Ecología y medio ambiente 30 14
Total 160 70

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Reacciones físicas / químicas en rellenos sanitarios

Debra Reinhart, Rainer Stegmann, en Relleno sanitario de residuos sólidos, 2018

Destino de los nanotubos de carbono de pared simple en los rellenos sanitarios de residuos sólidos urbanos

Los CNT son cilindros tubulares de grafito (p. Ej., Átomos de carbono con enlaces hexagonales) que se ha demostrado que exhiben propiedades fisicoquímicas novedosas (Popov, 2004). Estos nanomateriales artificiales (ENM) tienen una gran relación de longitud a diámetro, con diámetros de tubo típicamente inferiores a 100 nm y longitudes de hasta varios milímetros (Baughman et al., 2002 Huang et al., 2003 Popov, 2004). Debido a que tienen un módulo de Young & # x27s y una resistencia a la tracción altos, su uso en materiales compuestos es muy deseable (Baughman et al., 2002). Hay dos tipos principales de CNT: nanotubos de carbono de pared simple (SWNT), que consisten en una sola hoja de grafito enrollada en un cilindro sin costura, y nanotubos de carbono de paredes múltiples (MWNT), que consisten en una matriz de nanotubos concéntricos (Baughman et al., 2002). Los SWNT se han incorporado a una variedad de productos de consumo, incluidos artículos deportivos (p. Ej., Raquetas de tenis, piezas de bicicletas), discos compactos, utensilios de cocina, filtros de agua y plásticos (De Volder et al., 2013 Endo et al., 2008 Project on Nanotecnologías emergentes, 2013), mejorando en última instancia sus características.

A medida que estos productos de consumo cargados de NM lleguen al final de su vida útil, es probable que se desechen y finalmente se coloquen en vertederos de RSU. Se sabe poco sobre el destino de los SWNT (o cualquier tipo de CNT) en los vertederos de RSU. Aunque no se ha investigado específicamente, una vez que se colocan en un vertedero, es probable que se liberen ENM de estos productos en condiciones que normalmente se encuentran en los vertederos (Benn et al., 2010 Petersen et al., 2011). El estrés mecánico y la abrasión (como la experimentada durante la compactación) y el contacto posterior con lixiviados de naturaleza agresiva probablemente ayudarán a la liberación de nanopartículas unidas en plásticos / polímeros / productos metálicos (Froggett et al., 2014 Petersen et al., 2011). La forma del ENM liberado influirá en el destino del material y es probable que sea específico del producto, según el producto original, el tipo de NM, el escenario de liberación (por ejemplo, materiales triturados / molidos, meteorización) y el entorno de liberación (Froggett et al., 2014). Es posible que las fracciones de NM incrustadas se liberen como partículas discretas recubiertas, con una composición de recubrimiento similar a la del recubrimiento NM cuando se colocan dentro de los productos originales, como agregados recubiertos o incorporados dentro de componentes más pequeños del producto original (Froggett et al., 2014). Las observaciones de NM liberadas por compuestos poliméricos se han documentado recientemente en la literatura (Froggett et al., 2014 Liu et al., 2012). Cabe señalar que la liberación observada ocurrió en condiciones menos duras que las que se encuentran típicamente en los rellenos sanitarios (Froggett et al., 2014).

El destino del SWNT una vez liberado en el lixiviado es complicado y depende de varios factores interrelacionados, incluida la composición del lixiviado (por ejemplo, contenido orgánico, especies de electrolitos y concentración), forma del SWNT liberado, composición de los desechos sólidos y condiciones de flujo del lixiviado. Dos componentes críticos del lixiviado que influyen en el transporte de SWNT son la composición y concentración de materia orgánica y la fuerza iónica. Se ha demostrado que la concentración y composición de materia orgánica y electrolitos influyen significativamente en la agregación y deposición de NM y, por lo tanto, en la posterior movilidad del material en medios porosos. Se ha demostrado que la materia orgánica de alto peso molecular crea condiciones favorables para la estabilización de NM, lo que resulta en una movilidad de partículas significativa (Franchi y O & # x27Melia, 2003 Jaisi y Elimelech, 2009 Lanphere et al., 2013). Sin embargo, se ha demostrado que las concentraciones elevadas de electrolitos reducen la movilidad de los NM mediante la adsorción específica en sus superficies (Hahn y O & # x27Melia, 2004 Hong et al., 2009) y la compresión de doble capa. Debido a que la composición del lixiviado, que incluye tanto los orgánicos como los electrolitos, cambia con el tiempo como resultado de reacciones / transformaciones físicas, químicas y biológicas, es probable que la movilidad de SWNT también cambie con el tiempo / la edad de desperdicio.

La mayoría de los estudios que evalúan la movilidad de CNT se han realizado en sistemas que contienen medios porosos relativamente simples (por ejemplo, arena) y rangos estrechos de concentración de materia orgánica y concentraciones de electrolitos (Petosa et al., 2010). Pocos estudios han investigado la movilidad de los SWNT en entornos de desechos. Lozano y Berge (2012) realizaron experimentos a escala de laboratorio para evaluar cómo los orgánicos (ácido húmico: 20-800 mg / L), la fuerza iónica (NaCl 100-400 mM) y el pH (6-8) típico de los lixiviados maduros influyen en la SWNT comportamiento. Los resultados de los experimentos por lotes sugirieron que la presencia de compuestos orgánicos de alto peso molecular, como el ácido húmico, actuó para estabilizar los SWNT presentes en el lixiviado, incluso a concentraciones iónicas elevadas (& gt100 mM NaCl). Estos resultados también sugieren que en el lixiviado de relleno sanitario maduro, mientras el ácido húmico esté presente, la fuerza iónica (cuando se representa como NaCl) será un factor dominante que influirá en el destino de NM. Sin embargo, cabe señalar que la fuerza iónica se representó como NaCl. En el relleno sanitario, los iones multivalentes de lixiviados (p. Ej., Ca +2, Mg +2, La +3) también estarán presentes y probablemente serán un factor importante que influya en la movilidad de NM (Chen y Elimelech, 2007 Lin et al., 2009 Saleh et al. ., 2010). Lozano y Berge (2012) también encontraron que el pH, por encima del rango evaluado en este estudio y el esperado en lixiviados maduros (de 6 a 8), tuvo un impacto insignificante en el comportamiento de la NM.

Khan y col. (2013) estudiaron la movilidad a escala de laboratorio de los SWNT dispersos en una gama de soluciones de lixiviados sintéticos que representan tanto lixiviados maduros como jóvenes a través de un entorno de desechos sólidos representativo (desechos manufacturados que consisten en papel, metal, plástico, comida para conejos y vidrio). Se llevó a cabo una serie de experimentos de columna saturada 1-D que contenían materiales de desecho sólidos representativos para evaluar la influencia del tipo de materia orgánica (por ejemplo, ácido húmico y ácido acético) y la concentración en el transporte de SWNT. Los resultados de estos experimentos indicaron que el transporte de SWNT puede ser significativo en entornos de desechos maduros, con una movilidad que disminuye al disminuir la concentración de ácido húmico. Aproximadamente el 92% de los SWNT añadidos se retuvieron dentro de la columna de desechos cuando estaban en presencia de 10 mg / L de ácido húmico, mientras que solo el 30% de los SWNT añadidos se retuvieron cuando estaban en presencia de 400 mg / L de ácido húmico. La movilidad de SWNT en presencia de ácido acético se inhibió en gran medida (se retuvo el 94% de los SWNT introducidos), lo que sugiere que su movilidad en entornos de desechos jóvenes puede ser pequeña.

La composición de los residuos sólidos también influye en la movilidad SWNT. Los RSU típicos son heterogéneos, contienen componentes tanto orgánicos como inorgánicos y abarcan una amplia gama de tamaños de partículas y químicas de superficie que cambian con la edad y la descomposición de los desechos. Khan y col. (2013) llevaron a cabo una serie de experimentos con columnas que contienen materiales de desecho individuales (por ejemplo, papel, vidrio metálico) para evaluar la influencia del tipo de desecho en el transporte de SWNT. Los resultados de estos experimentos indicaron que el transporte de SWNT a través de metal, plástico y vidrio fue significativo, con recuperaciones de efluentes medidas del 77%, 88% y 93%, respectivamente. La mayor retención de SWNT se observó en el papel, con solo el 20% de la masa de SWNT introducida recuperada en el efluente de la columna, lo que sugiere que el papel puede ser responsable de la mayor parte de la retención de SWNT en entornos de residuos mixtos. Estas diferencias en el transporte SWNT sugieren que las características de la superficie del material, como la rugosidad y la química de la superficie, influyen en el transporte. Las condiciones de flujo dentro de los vertederos también influyen en el transporte de NM. Las condiciones de flujo variable, la heterogeneidad de los desechos y el flujo preferencial en los vertederos influirán en la movilidad del SWNT. Se ha descubierto que la velocidad del flujo influye en gran medida en la movilidad de nC60 NM en medios porosos saturados (Li et al., 2008). Además, la unión de TiO2 Se observaron NM en la interfaz aire-agua durante los procesos de drenaje (Chen et al., 2008), lo que sugiere que las condiciones insaturadas típicas de los rellenos sanitarios influirán en la movilidad de SWNT, lo que posiblemente resulte en una mayor retención de SWNT.

Existe una clara necesidad de trabajo adicional para evaluar y comprender el comportamiento de SWNT (y otros NM) en entornos de desechos. Aunque Lozano y Berge (2012) y Khan et al. (2013) han proporcionado información asociada con la comprensión del destino de SWNT dentro de entornos de desechos, existe una brecha significativa entre las condiciones modeladas en los experimentos de laboratorio realizados y las condiciones reales en los vertederos de RSU.


Abstracto

Se sintetizó eficazmente una gama de derivados de fenantreno mediante la anulación catalizada por paladio de 2,2'-diyodobifenilos con alquinos. Se investigó el alcance, las limitaciones y la regioselectividad de la reacción. El método descrito se adoptó para sintetizar 9,10-dialquilfenantrenos, fenantrenos 4,5-disustituidos estéricamente superpoblados y alcaloides basados ​​en fenantreno. Las reacciones de bifenilos altamente sustituidos con metoxi con 2- (2-propinil) pirrolidina y 2- (2-propinil) piperidina dieron 2- (9-fenantilmetil) pirrolidinas y 2- (9-fenantilmetil) piperidinas, respectivamente. Los productos se transformaron en alcaloides de fenantroindolizidina y fenantroquinolizidina mediante la reacción de Pictet-Spengler.


2. MATERIALES Y MÉTODOS

2.1 Materiales

Las muestras periféricas procedían de 9 voluntarios sanos (rango de edad de 28 a 44 años, media de 33 años). Se obtuvo el consentimiento informado de todos los donantes antes del estudio.

2.2 Métodos

2.2.1 Aislamiento de linfocitos y cultivo celular

Las PBMC se aislaron en un gradiente de Ficoll-Hypaque. Los subconjuntos CD4 + CD25 - y CD4 + CD25 + se separaron usando perlas magnéticas (CD4 + CD25 + Kit de aislamiento de células T reguladoras Miltenyi Biotec, Bergisch-Gladbach, Alemania). Se recogieron Treg naturales CD4 + CD25 alto con una pureza que variaba entre el 69 y el 86%.

Se estimularon Treg naturales con anti-CD3 Ab inmovilizado a 0,5 μg / ml (BD Biosciences, Le pont de Claix, Francia) o IL-2 soluble a 300 UI / ml (R and D Systems, Minneapolis, MN) durante 5 días en la presencia o ausencia de ITE a 1 μM o 10 μM (Tocris Biosciences, Bistrol, Reino Unido).

La generación de novo de Tregs se realizó como describimos anteriormente. 9 Brevemente, se estimularon linfocitos T periféricos CD4 + CD25 purificados en placas de 24 pocillos (10 6 / pocillo) con anti-CD3 Ab unido a placa a 1 μg / ml, anti-CD28 Ab soluble a 1 μg / ml (BD Biociencias) y TGF-β a 10 ng / ml (sistemas R y D). Se añadió o no ITE a diferentes concentraciones (0,1, 1 y 10 µM). Después de 5 días, los linfocitos CD4 + CD25 - autólogos se aislaron nuevamente y se estimularon en placas de 96 pocillos (10 5 / pocillo) con anti-CD3 Ab inmovilizado a 0.5 μg / ml (BD Biosciences), luego se agregaron a CD4 + generado de novo Células T CD25 +, Treg CD4 + CD25 + naturales recién aisladas a 1 × 10 5 / pocillo, o Treg CD4 + CD25 + naturales estimuladas con ITE a 10 μM (proporción 1: 1 y proporción 1: 0,25 de respuesta a células reguladoras) durante 5 días.

Para los estudios de proliferación, se midió la absorción de [3 H] timidina (Amersham, Saclay France) 18 h después de agregar 0,4 μCi / pocillo. Se recogieron las células y se contó la radiactividad en un contador de centelleo.

2.2.2 Citometría de flujo

Para el marcaje intracelular de Foxp3, los linfocitos se marcaron con anti-CD4-FITC Ab durante 20 min en hielo. Después del lavado, las células se fijaron con 1 ml de tampón Foxp3A humano (BD Biosciences) durante 10 min a temperatura ambiente y luego se permeabilizaron con 500 μl de tampón C Foxp3 humano (BD Biosciences). Después de un lavado con PBS suplementado con 2% de BSA (albúmina de suero bovino), las células se marcaron con un anti-Foxp3 Ab conjugado con ficoeritrina (BD Biosciences). A continuación, las células se lavaron y analizaron en 4 h utilizando un citómetro de flujo (FACS Canto II, BD Biosciences).

2.2.3 Medición de IL-10 por ELISA

Las concentraciones de IL-10 en los sobrenadantes de células de Tregs generadas de novo se midieron mediante ELISA usando IL-10 humana ELISA Set BD optEIA (BD Biosciences) siguiendo las instrucciones del fabricante. La concentración de IL-10 se determinó según una curva estándar.

2.2.4 Expresión de ARNm de Foxp3 mediante RT-PCR en tiempo real

El ARN total se extrajo de Tregs generados de novo usando RNeasy Mini Kit (Qiagen, Hilden, Alemania). Después de la transcripción inversa, Foxp3 Las transcripciones de ARNm se cuantificaron mediante PCR en tiempo real utilizando ensayos de expresión génica disponibles y Taqman PCR Master Mix (Applied Biosystems). Los datos se normalizaron referidos a la expresión de un gen endógeno, proteína ribosomal, gran PO (RPLPO), calculando 2 –∆CT, siendo ∆CT la diferencia en ciclos umbral para diana y referencia.

2.2.5 Análisis estadístico

Los análisis estadísticos se realizaron utilizando el software Prism. Para cada prueba, los datos obtenidos de los diferentes donantes (agrupados de los diferentes experimentos) fueron comparados por el t-prueba. La significancia estadística se asignó a un valor de PAG & lt 0,05.


2.2: Hidrocarburos - Biología

El petróleo crudo es una mezcla compleja de hidrocarburos. Los hidrocarburos son moléculas de cadena de diferentes longitudes compuestas únicamente por átomos de carbono e hidrógeno, unidas por enlaces covalentes. Los enlaces covalentes se forman cuando los átomos comparten un par de electrones.

La mayoría de los hidrocarburos del petróleo crudo son hidrocarburos llamados alcanos. Los alcanos se denominan moléculas saturadas. El término saturado significa que contienen el máximo número de hidrógeno posible, sin enlaces dobles o triples entre los átomos de carbono. Por lo tanto, los alcanos solo contienen enlaces simples.

Serie homóloga de alcanos

Los alcanos forman una serie homóloga. Una serie homóloga de hidrocarburos es una serie de hidrocarburos que:

  • Tienen la misma fórmula general
  • Diferenciar por CH2 en fórmulas moleculares de compuestos vecinos
  • Muestra una variación gradual en las propiedades físicas, es decir, punto de ebullición y punto de fusión.
  • Tienen propiedades químicas similares

La fórmula general para la serie homóloga de alcanos es CnorteH2n + 2donde n es el número de átomos de carbono.

Todos los alcanos terminan en y ldquoane& rdquo. Los primeros cuatro alcanos de la serie homóloga conservan sus nombres originales. Después de estos, los nombres se forman agregando la terminación:ane a la palabra griega para el número de átomos de carbono en la molécula. Por ejemplo pentano se forma a partir de la palabra encerrado (Griego para cinco) y el sufijo -ane, y hexano de maleficio (Griego para seis) y el final -ane. Así, la primera parte del nombre indica el número de átomos de carbono y la terminación que es un alcano.

Cada molécula sucesiva en la serie homóloga de alcanos se forma agregando un átomo de carbono y dos átomos de hidrógeno o un CH2 (grupo metileno) a la molécula anterior. El cambio incremental en la masa molecular relativa es, por tanto, catorce.

La siguiente tabla muestra los primeros ocho alcanos de cadena recta de la serie homóloga de alcanos.


Síntesis de compuestos aromáticos policíclicos funcionalizados mediante una cicloadición formal [2 + 2]

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