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¿Es correcto este experimento para verificar la velocidad de reacción de la enzima de acuerdo con la concentración de sustrato?

¿Es correcto este experimento para verificar la velocidad de reacción de la enzima de acuerdo con la concentración de sustrato?


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Acabamos de realizar un experimento para comprobar la velocidad de reacción de la enzima de acuerdo con la concentración de sustrato.
En el experimento, usamos una cantidad variable de sustrato y la misma cantidad de enzima:

(1,5 mm de enzima, 4,0 mm de agua, 0,5 mm de profundidad)
(Enzima de 1,5 mm, agua de 3,5 mm, subs de 1,0 mm)
(1,5 mm de enzima, 2,5 mm de agua, 2,0 mm de subs)
(1,5 mm de enzima, 1,5 mm de agua, subs de 3,0 mm)
(1,5 mm de enzima, 0 mm de agua, 4,5 mm de profundidad)

Verificamos la velocidad observando la densidad óptica después de 3 minutos.

Al mirar esto, no pude evitar preguntarme: ¡No solo cambiamos la concentración del sustrato! ¡También cambiamos su cantidad!

Si bien 3.0 / 4.5 es una concentración más alta que 0.5 / 4.5, también es una cantidad más alta, lo que sin duda da como resultado un tiempo de reacción más largo. Si lo comprobamos después de 3 minutos, existe la posibilidad de que los submarinos de 0,5 mm ya se hayan ido.

Si realmente quisiéramos ver la tasa de acuerdo con la concentración, ¿no deberíamos haber cambiado solo la cantidad de agua? También cambia la concentración de la enzima, pero ¿hay alguna forma de aislar alguna de ellas?


Creo que hay algunas respuestas importantes en tu pregunta.

  • La concentración de enzima es la misma en cada cámara de reacción. El volumen de cada cámara es de 6 ml y está utilizando 1,5 ml de enzima en un volumen final de 6 ml, por lo que el factor de dilución (el mismo en todas las cámaras) es 1 en 4. Entonces, si la concentración de enzima stock es 4 micromolar (como un ejemplo), la concentración de enzima es 1 micromolar en cada cámara de reacción.
  • La concentración de sustrato varía en cada cámara de reacción. DEBE tener en cuenta el factor de dilución al calcular la concentración final del sustrato. No me dice cuál es la concentración de sustrato stock, pero si es 1 mM como ejemplo, entonces en la cámara de reacción 1 está tomando 0,5 ml de una solución 1 mM en un final volumen de 6 ml, que es una dilución de 1 en 12. La concentración de sustrato en la cámara de reacción es por tanto 1/12 mM (aproximadamente 83,33 micromolar). De manera similar, la concentración en la cámara de reacción final (4,5 ml en un volumen final de 6 ml, factor de dilución de 1,33) es de aproximadamente 750 micromolar.

  • Tiene razón, medir la velocidad de reacción tomando un solo punto de tiempo después de 3 minutos es peligroso. Por supuesto, debe medir la tasa inicial si desea analizar los resultados de acuerdo con la ecuación de Michalis-Menten. La suposición que está haciendo es que el la tasa es lineal durante un período de 3. minutos para todas las concentraciones de sustrato. Si no es así, deberá rediseñar su experimento para tomar varios puntos de tiempo y tomar la tangente a la curva. Creo que debe estar interesado en determinar la constante de Michaelis.

  • En el lenguaje de la cinética enzimática, está haciendo un ensayo discontinuo con un único punto de tiempo después de 3 minutos como medida de la tasa inicial en una serie de concentraciones de sustrato. Un mejor enfoque, si está disponible, es usar un ensayo continuo, por ejemplo, monitoreando continuamente el cambio de absorbancia de NADH con el tiempo a 340 nm. Pero, por supuesto, el ensayo continuo no siempre está disponible.

  • Me sorprende que uses agua para diluir. ¿Dónde está el búfer? ¿Y cómo controlar el pH en su cámara? Quizás las soluciones madre de enzima y sustrato se preparan en tampón, ¿es esta la explicación?

  • También debe verificar que la velocidad frente a la concentración de enzima sea lineal en todas las concentraciones de sustrato.


Brent Cornell


Al diseñar un experimento para probar el efecto de los factores que afectan la actividad enzimática, las tres decisiones clave que se deben tomar son:

  • Qué factor investigar (es decir, la variable independiente)
  • Qué reacción de enzima / sustrato usar
  • Cómo medir la actividad enzimática (es decir, la variable dependiente)

Elección de la variable independiente

Los principales factores que afectarán la actividad de una enzima sobre un sustrato determinado son:

  • Temperatura (use baños de agua para minimizar las fluctuaciones)
  • pH (soluciones ácidas o alcalinas)
  • Concentración de sustrato (elija el rango para evitar la saturación)
  • Presencia de inhibidor (el tipo de inhibidor será específico de la enzima)

Seleccionar una enzima y un sustrato

La selección dependerá de la disponibilidad dentro de la escuela, sin embargo, ciertas enzimas se pueden extraer de fuentes comunes de alimentos.

Ejemplos de reacciones catalizadas por enzimas comunes incluyen:

Medición de la actividad enzimática

El método de recopilación de datos dependerá de la reacción que se produzca; por lo general, la mayoría de las reacciones se miden de acuerdo con:


Se ha demostrado experimentalmente que si la cantidad de enzima se mantiene constante y luego se aumenta gradualmente la concentración de sustrato, la velocidad de reacción aumentará hasta alcanzar un máximo. Después de este punto, los aumentos en la concentración de sustrato no aumentarán la velocidad (delta A / delta T). Esto se representa gráficamente en la Figura 8.

Se teoriza que cuando se alcanzó esta velocidad máxima, toda la enzima disponible se convirtió en ES, el complejo de sustrato enzimático. Este punto del gráfico se designa como Vmax. Usando esta velocidad máxima y la ecuación (7), Michaelis desarrolló un conjunto de expresiones matemáticas para calcular la actividad enzimática en términos de velocidad de reacción a partir de datos de laboratorio medibles.

La constante de Michaelis Km se define como la concentración de sustrato a la mitad de la velocidad máxima. Esto se muestra en la Figura 8. Usando esta constante y el hecho de que Km también se puede definir como:

K +1, K -1 y K +2 son las constantes de velocidad de la ecuación (7). Michaelis desarrolló lo siguiente


Se han determinado las constantes de Michaelis para muchas de las enzimas comúnmente utilizadas. El tamaño de Km nos dice varias cosas sobre una enzima en particular.

  • Un pequeño Km indica que la enzima requiere solo una pequeña cantidad de sustrato para saturarse. Por tanto, la velocidad máxima se alcanza a concentraciones de sustrato relativamente bajas.
  • Un Km grande indica la necesidad de altas concentraciones de sustrato para lograr la máxima velocidad de reacción.
  • Con frecuencia se supone que el sustrato con la Km más baja sobre el que actúa la enzima como catalizador es el sustrato natural de la enzima, aunque esto no es cierto para todas las enzimas.

Prueba de bioquímica MCAT

Pregunta 1
¿Cuál de las siguientes afirmaciones sobre la cinética enzimática es FALSA?
A. Un aumento en la concentración de sustrato (a una concentración constante de enzima) conduce a aumentos proporcionales en la velocidad de la reacción.
B. La mayoría de las enzimas que operan en el cuerpo humano funcionan mejor a una temperatura de 37 ° C.
C. Un complejo enzima-sustrato puede formar un producto o disociarse nuevamente en la enzima y el sustrato.
D. La actividad máxima de muchas enzimas humanas se produce alrededor de un pH de 7,4.

A: La mayoría de las enzimas del cuerpo humano operan a una actividad máxima alrededor de una temperatura de 37 ° C y un pH de 7,4, que es el pH de la mayoría de los fluidos corporales. Además, como se caracteriza por la ecuación de Michaelis-Menten, las enzimas forman un complejo enzima-sustrato, que puede disociarse nuevamente en la enzima y el sustrato o proceder a formar un producto. Hasta ahora, podemos eliminar las opciones (B), (C) y (D), así que verifiquemos la opción (A). Un aumento en la concentración de sustrato, mientras se mantiene una concentración de enzima constante, conduce a un aumento proporcional en la velocidad de la reacción solo inicialmente. Sin embargo, una vez que la mayoría de los sitios activos están ocupados, la velocidad de reacción se estabiliza, independientemente de los aumentos adicionales en la concentración de sustrato. A altas concentraciones de sustrato, la velocidad de reacción se acerca a su velocidad máxima y ya no cambia por aumentos adicionales en la concentración de sustrato.

Pregunta 2
¿Qué dos polisacáridos comparten todos sus tipos de enlaces glicosídicos en común?
A. Celulosa y amilopectina
B. Amilosa y glucógeno
C. Amilosa y celulosa
D. Glucógeno y amilopectina

D: El glucógeno y la amilopectina son las únicas formas de polisacáridos que muestran una estructura ramificada, lo que las hace más similares en términos de enlace. Tanto el glucógeno como la amilopectina usan enlaces α-1,4 y α-1,6. La celulosa usa enlaces β-1,4 y la amilosa no contiene enlaces α-1,6.

Pregunta 3
¿Cuál de las siguientes opciones es correcta sobre las vitaminas solubles en grasa?
I. La vitamina E es importante para la regulación del calcio.
II. La vitamina D protege contra el cáncer porque es un antioxidante biológico.
III. La vitamina K es necesaria para la introducción postraduccional de los sitios de unión al calcio.
IV. La vitamina A se metaboliza a la retina, que es importante para la vista.
A. III solamente
B. I y II solamente
C. III y IV solamente
D. II, III y IV solamente

C: La vitamina A se metaboliza a la retina, que es importante para la vista. La vitamina D se metaboliza a calcitriol, que es importante para la regulación del calcio. La vitamina E está compuesta por tocoferoles, que son antioxidantes biológicos. La vitamina K es necesaria para la introducción de sitios de unión al calcio, como durante la modificación postraduccional de la protrombina.

Pregunta 4
Las topoisomerasas son enzimas involucradas en:
A. Replicación y transcripción del ADN.
B. procesamiento postranscripcional.
C. Síntesis y traducción de ARN.
D. procesamiento postraduccional.

A: Las topoisomerasas, como la ADN girasa procariota, participan en la replicación del ADN y la síntesis (transcripción) del ARNm. La ADN girasa es un tipo de topoisomerasa que mejora la acción de las enzimas helicasa mediante la introducción de superenrollamientos negativos en la molécula de ADN. Estos superenrollamientos negativos facilitan la replicación del ADN al mantener las hebras separadas y desenredadas.

Pregunta 5
¿Cuál de las siguientes afirmaciones se aplica a la difusión y la ósmosis?
R. La difusión y la ósmosis dependen del gradiente electroquímico únicamente del compuesto de interés.
B. La difusión y la ósmosis dependen del gradiente electroquímico de todos los compuestos en una celda.
C. La difusión y la ósmosis procederán en la misma dirección si solo hay un soluto.
D. La difusión y la ósmosis no pueden ocurrir simultáneamente.

A: El movimiento de cualquier soluto o agua por difusión u ósmosis depende únicamente del gradiente de concentración de esa molécula y de la permeabilidad de la membrana.


Concentración de iones de hidrógeno (pH)

Debido a que la mayoría de las enzimas son proteínas, son sensibles a los cambios en la concentración de iones de hidrógeno o el pH. Las enzimas pueden desnaturalizarse por niveles extremos de iones de hidrógeno (ya sean altos o bajos) alguna El cambio de pH, incluso uno pequeño, altera el grado de ionización de una enzima y los grupos laterales ácidos y básicos de una enzima y los componentes del sustrato también. Los grupos laterales ionizables ubicados en el sitio activo deben tener una cierta carga para que la enzima se una a su sustrato. La neutralización de incluso una de estas cargas altera la actividad catalítica de una enzima y rsquos.

Una enzima exhibe una actividad máxima en el estrecho rango de pH en el que existe una molécula en su forma debidamente cargada. El valor mediano de este rango de pH se denomina pH óptimo de la enzima (parte (b) de la Figura ( PageIndex <2> )). Con la notable excepción del jugo gástrico (los fluidos secretados en el estómago), la mayoría de los fluidos corporales tienen valores de pH entre 6 y 8. No es sorprendente que la mayoría de las enzimas exhiban una actividad óptima en este rango de pH. Sin embargo, algunas enzimas tienen valores de pH óptimos fuera de este rango. Por ejemplo, el pH óptimo de la pepsina, una enzima activa en el estómago, es 2,0.


Ecuación de Michaelis y ndash Menten

Leonor Michaelis y Maud Menten postularon que la enzima primero se combina reversiblemente con su sustrato para formar un complejo enzima-sustrato en un paso reversible relativamente rápido:


Ecuación 1

En el siguiente paso, este complejo ES se descompone en la enzima libre y el producto de reacción P:

Ecuación 2

Dado que el segundo paso es el paso de limitación de la velocidad, la velocidad de la reacción general debe ser proporcional a la concentración del ES que reacciona en el segundo paso. La relación entre la concentración de sustrato, [S] y la velocidad inicial de la enzima, V0 (Fig. 1) tiene la misma forma general para la mayoría de las enzimas (se aproxima a una hipérbola rectangular). Esto se puede expresar algebraicamente mediante la ecuación de Michaelis-Menten. Basado en su hipótesis básica de que el paso limitante de la velocidad en las reacciones enzimáticas es la descomposición del complejo ES en enzima libre y producto, Michaelis y Menten derivaron una ecuación que es

Ecuación 3

Los términos necesarios en esta reacción son [S], V0, Vmax y Km (constante de Michaelis),. Todos estos términos se pueden medir experimentalmente.

Trama de Lineweaver y ndash Burke


En 1934, Lineweaver y Burke hicieron una simple alteración matemática en el proceso al trazar un doble inverso de la concentración de sustrato y la velocidad de reacción.


Ecuación 4


Para las enzimas que obedecen a la relación de Michaelis-Menten, el & ldquodouble recíproco & rdquo del V0 versus [S] del primer gráfico, (fig1) produce una línea recta (Fig. 2). La pendiente de esta línea recta es KM / Vmax, que tiene una intersección de 1 / Vmax en el eje 1 / V0 y una intersección de -1 / KM en el eje 1 / [S]. La presentación recíproca doble, también llamada trama Lineweaver-Burk. La principal ventaja de la gráfica de Lineweaver-Burk es determinar la Vmax con mayor precisión, que solo se puede aproximar a partir de una gráfica simple de V0 versus [S] (Fig 1).



Fig2: Gráfico de Lineweaver-Burk.

Adaptado de David L. Nelson, Michael M. Cox, Principios de bioquímica de Lehninger, 4ª edición.


Derivación de la ecuación de Michaelis-Menten

Memorice esta derivación tan pronto como la encuentre en su texto, y podrá leer el resto del capítulo con una comprensión mucho mayor. Para obtener otras sugerencias sobre cómo facilitar el estudio de la bioquímica, consulte Estrategias de aprendizaje.

Un modelo simple de acción enzimática:

Nos gustaría saber cómo reconocer una enzima que se comporta según este modelo. Una forma es observar el comportamiento cinético de la enzima: cómo la concentración de sustrato afecta su velocidad. Así que queremos saber qué ley de velocidad obedecería tal enzima. Si una enzima recién descubierta obedece a la ley de velocidad derivada de este modelo, entonces es razonable suponer que la enzima reacciona de acuerdo con este modelo. No es una prueba de que el modelo sea correcto, pero al menos nos dice que la cinética no lo descarta.

Derivemos una ley de tasas de este modelo.

Para este modelo, sea V 0 la velocidad inicial de la reacción. Luego

La velocidad máxima V max ocurre cuando la enzima está saturada, es decir, cuando

todas las moléculas de enzima están ligadas con S, o

Entonces V max = k cat & # 91E & # 93 en total. (3)

Queremos expresar V 0 en términos de cantidades medibles, como & # 91S & # 93 y & # 91E & # 93 en total, para que podamos ver cómo probar el mecanismo mediante experimentos en cinética. Entonces debemos reemplazar & # 91ES & # 93 en (2) con medibles.

Durante la fase inicial de la reacción, siempre que la velocidad de la reacción permanezca constante, la reacción está en un estado estacionario, formándose y consumiendo ES a la misma velocidad. Durante esta fase, la tasa de formación de & # 91ES & # 93 es igual a su tasa de consumo. Según modelo (1),

Tasa de formación de ES = k 1 & # 91E & # 93 & # 91S & # 93.

Tasa de consumo de ES = k -1 & # 91ES & # 93 + k cat & # 91ES & # 93.

Entonces, en el estado estable, k -1 & # 91ES & # 93 + k cat & # 91ES & # 93 = k 1 & # 91E & # 93 & # 91S & # 93. (4)

Recuerde que estamos tratando de resolver & # 91ES & # 93 en términos de variables mensurables, de modo que podamos reemplazarlo en (2). Primero, recopile las constantes cinéticas en (4):

Para simplificar (5), primero agrupe las constantes cinéticas definiéndolas como K m:

y luego exprese & # 91E & # 93 en términos de & # 91ES & # 93 y & # 91E & # 93total:

Sustituya (6) y (7) en (5):

Resuelva (8) para & # 91ES & # 93: Primero multiplique ambos lados por & # 91ES & # 93:

Luego, recopile los términos que contengan & # 91ES & # 93 a la izquierda:

Factoriza & # 91ES & # 93 de los términos de la izquierda:

y finalmente, divida ambos lados por (K m + & # 91S & # 93):

Sustituya (9) en (2): V 0 = k cat & # 91E & # 93 total & # 91S & # 93 / (K m + & # 91S & # 93) (10)

Recordando (3), sustituya V max en (10) por k cat & # 91E & # 93 total:

V 0 = V máx. & # 91S & # 93 / (K m + & # 91S & # 93) (11)

Esta ecuación expresa la velocidad inicial de reacción en términos de una cantidad medible, la concentración inicial de sustrato. Los dos parámetros cinéticos, V max y K m, serán diferentes para cada par enzima-sustrato.

La ecuación (11), la ecuación de Michaelis-Menten, describe el comportamiento cinético de una enzima que actúa según el modelo simple (1). La ecuación (11) tiene la forma

y = ax / (b + x) (¿te suena esto?)

Esta es la ecuación de una hipérbola rectangular, al igual que la ecuación de saturación para la unión del dioxígeno a la mioglobina.

La ecuación (11) significa que, para una enzima que actúa de acuerdo con el modelo simple (1), una gráfica de V 0 versus & # 91S & # 93 será una hipérbola rectangular. Cuando las enzimas exhiben este comportamiento cinético, a menos que encontremos otra evidencia en contrario, asumimos que actúan según el modelo (1), y las llamamos enzimas de Michaelis-Menten.

EXAMEN para estudiantes de USM

Prueba de la primera clase sobre cinética enzimática: Derive la ecuación (11) del modelo (1).


¿Es correcto este experimento para verificar la velocidad de reacción de la enzima de acuerdo con la concentración de sustrato? - biología

Catalasa

Peróxido de hidrógeno (H2O2) es un subproducto común de reacciones metabólicas. En alta concentración es tóxico por lo que su acumulación en las células sería perjudicial. La mayoría de los tejidos, sin embargo, contienen la enzima catalasa, que cataliza la descomposición del peróxido en agua y oxígeno de la siguiente manera: La reacción es extremadamente rápida. La acción de la enzima puede demostrarse fácilmente mediante la evolución de oxígeno en forma de burbujas de gas cuando se añade un extracto de un tejido que contiene la enzima a una solución diluida de peróxido de hidrógeno. Utilizaremos hígado de res o pollo homogeneizado (molido) como fuente de catalasa. Catalasa

  • Catalasa - información general Aulas del siglo XXI
  • Catalasa: una enzima extraordinaria
  • Enzima de desnaturalización por calor
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  • Enlaces -

Amilasa

    Referencias de amilasa:
    • Amilasa: estudio independiente de Amy Caruana (estudiante de la Universidad de Kean)
    • Amilasa - resultados de la U. Dakota del Norte
    • Enzimas amilasa, temperatura, pH, concentración de sustrato
    • Prueba de Benedicts para reducir el azúcar - imagen del resultado
    • Amilasa ¿Cómo actúa?
    • Amilasa - hidrólisis del almidón
    • Amilasa salival - pH
    Pepsina es una proteasa que inicia la digestión de proteínas, descomponiéndolas en péptidos y aminoácidos. El pepsinógeno es secretado por las glándulas gástricas del estómago hacia el estómago. Allí, en el ambiente ácido del estómago, el pepsinógeno se convierte en pepsina.

    Aunque tanto la pepsina como la tripsina son proteasas, requieren condiciones bastante diferentes de acidez y alcalinidad para su acción.

      Referencias de pepsina:
      • Pepsina -
      • Pepsina - molécula del mes
      • pH óptimo -
      • Pepsina: menciona el pH óptimo
      Tripsina es una proteasa secretada en el intestino delgado por el páncreas. Como pepsina, la tripsina digiere las proteínas en péptidos y aminoácidos y se produce y secreta en una forma inactiva, tripsinógeno.

      Aunque tanto la pepsina como la tripsina son proteasas, requieren condiciones bastante diferentes de acidez y alcalinidad para su acción.

        Referencias de tripsina:
        • Descripción de la enciclopedia de tripsina
        • Búsqueda de ilustración de tripsina dentro de este archivo grande
        • Imágenes del motor de búsqueda de Google

        Una analogía

        Suponga que está interesado en comprar una pizzería y desea investigar qué tan productiva es la tienda sin que el propietario actual lo sepa porque teme que el propietario aumente el precio. Entonces, en lugar de ir a la tienda y ver lo que sucede y pedir examinar los libros que registran los gastos y las ganancias, decide mirar la tienda desde afuera.

        Observa la frecuencia con la que llegan camiones con masa para pizza, aderezos para pizza (queso, pepporoni, etc.) y otros suministros. También observa la frecuencia con la que los trabajadores salen de la tienda para entregar pizzas a los clientes.

        En esta analogía, los suministros de pizza son los reactivos y las pizzas en caja que se entregan a los clientes son los productos finales. Los trabajadores dentro de la tienda que dan forma a la masa, agregan los toppings y colocan las pizzas en hornos y finalmente en cajas son el equivalente de las enzimas.

        Aunque en realidad no vemos a los trabajadores haciendo su trabajo, podemos inferir que si la tienda está usando grandes cantidades de reactivos (masa y aderezos) y / o elaborando una gran cantidad de productos finales (pizzas), los trabajadores (enzimas) deben Sea muy activo.


        Tipos de ensayo

        Todos los ensayos enzimáticos miden el consumo de sustrato o la producción de producto a lo largo del tiempo. Existe un gran número de métodos diferentes para medir las concentraciones de sustratos y productos y muchas enzimas pueden ensayarse de varias formas diferentes. Los bioquímicos suelen estudiar las reacciones catalizadas por enzimas mediante cuatro tipos de experimentos: [2]

        (1) Experimentos de tasa inicial. Cuando una enzima se mezcla con un gran exceso de sustrato, el intermedio enzima-sustrato se acumula en un transitorio inicial rápido. Luego, la reacción logra una cinética de estado estacionario en la que los intermedios del sustrato enzimático permanecen aproximadamente constantes a lo largo del tiempo y la velocidad de reacción cambia de manera relativamente lenta. Las tasas se miden durante un período corto después de alcanzar el estado cuasi-estacionario, generalmente mediante el seguimiento de la acumulación de producto con el tiempo. Debido a que las mediciones se llevan a cabo durante un período muy corto y debido al gran exceso de sustrato, se puede realizar el sustrato libre de aproximación es aproximadamente igual al sustrato inicial. El experimento de velocidad inicial es el más simple de realizar y analizar, ya que está relativamente libre de complicaciones como la reacción inversa y la degradación enzimática. Por tanto, es, con mucho, el tipo de experimento más utilizado en cinética enzimática.

        (2) Experimentos de curva de progreso. En estos experimentos, los parámetros cinéticos se determinan a partir de expresiones para las concentraciones de especies en función del tiempo. La concentración del sustrato o producto se registra en el tiempo después del transitorio rápido inicial y durante un período suficientemente largo para permitir que la reacción se acerque al equilibrio. Observamos de pasada que, si bien ahora son menos comunes, los experimentos de curvas de progreso se utilizaron ampliamente en el período inicial de la cinética enzimática.

        (3) Experimentos de cinética transitoria. En estos experimentos, el comportamiento de la reacción se rastrea durante el transitorio rápido inicial cuando el intermedio alcanza el período de cinética de estado estacionario. Estos experimentos son más difíciles de realizar que cualquiera de las dos clases anteriores porque requieren técnicas rápidas de mezcla y observación.

        (4) Experimentos de relajación. En estos experimentos, se perturba una mezcla en equilibrio de enzima, sustrato y producto, por ejemplo, por un salto de temperatura, presión o pH, y se controla el retorno al equilibrio. El análisis de estos experimentos requiere considerar la reacción completamente reversible. Además, los experimentos de relajación son relativamente insensibles a los detalles mecánicos y, por lo tanto, no se utilizan normalmente para la identificación de mecanismos, aunque pueden realizarse en condiciones adecuadas.

        Los ensayos de enzimas se pueden dividir en dos grupos según su método de muestreo: ensayos continuos, donde el ensayo da una lectura continua de la actividad, y ensayos discontinuos, donde se toman las muestras, se detiene la reacción y luego se determina la concentración de sustratos / productos.


        Experimento de catalasa y peróxido de hidrógeno

        ¿Cómo interactúan las células vivas con el entorno que las rodea? Todos los seres vivos poseen catalizadores, o sustancias dentro de ellos que aceleran las reacciones y procesos químicos. Enzimas son moléculas que posibilitan las reacciones químicas que ocurren en todos los seres vivos de la tierra. En este experimento de catalasa y peróxido de hidrógeno, descubriremos cómo las enzimas actúan como catalizadores al hacer que las reacciones químicas se produzcan más rápidamente dentro de los seres vivos. Usando una papa y peróxido de hidrógeno, podemos observar cómo enzimas como catalasa trabajo para realizar descomposición, o la descomposición, de otras sustancias. La catalasa actúa para acelerar la descomposición del peróxido de hidrógeno en oxígeno y agua. También probaremos cómo este proceso se ve afectado por cambios en la temperatura de la papa. ¿Es el proceso más rápido o más lento en comparación con el experimento de control realizado a temperatura ambiente?

        Problema

        ¿Qué sucede cuando una papa se combina con peróxido de hidrógeno?

        Materiales

        Procedimiento

        1. Divida la papa en tres secciones aproximadamente iguales.
        2. Mantenga una sección cruda y a temperatura ambiente.
        3. Coloque otra sección en el congelador durante al menos 30 minutos.
        4. Hervir la última sección durante al menos 5 minutos.
        5. Pique y triture una pequeña muestra (aproximadamente una cucharada) de papa a temperatura ambiente y colóquela en un vaso de precipitados o taza.
        6. Vierta suficiente peróxido de hidrógeno en la taza para que la papa se sumerja y observe.
        7. Repita los pasos 5 y 6 con las secciones de papa hervidas y congeladas.

        Observaciones y resultados de amplificación

        Observe cada una de las mezclas de papa / peróxido de hidrógeno y registre lo que sucede. La reacción de burbujeo que ves es el proceso metabólico de descomposición, descrito anteriormente. Esta reacción es causada por la catalasa, una enzima dentro de la papa. Está observando que la catalasa rompe el peróxido de hidrógeno en oxígeno y agua. ¿Qué muestra de papa descompuso más peróxido de hidrógeno? ¿Cuál reaccionó menos?

        Debería haber notado que la papa hervida produce poca o ninguna burbuja. Esto se debe a que el calor degradó la enzima catalasa, haciéndola incapaz de procesar el peróxido de hidrógeno. La papa congelada debería haber producido menos burbujas que la muestra a temperatura ambiente porque la temperatura fría disminuyó la capacidad de la enzima catalasa para descomponer el peróxido de hidrógeno. La papa a temperatura ambiente produjo la mayor cantidad de burbujas porque la catalasa funciona mejor a temperatura ambiente.

        Conclusiones

        La catalasa actúa como enzima catalizadora en la descomposición del peróxido de hidrógeno. Casi todos los seres vivos poseen catalasa, ¡incluyéndonos a nosotros! Esta enzima, como muchas otras, ayuda en la descomposición de una sustancia en otra. La catalasa descompone o descompone el peróxido de hidrógeno en agua y oxígeno.

        ¿Quieres echar un vistazo más de cerca? ¡Vaya más allá en este experimento al observar una muestra muy pequeña de papa combinada con peróxido de hidrógeno bajo un microscopio!

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        Ver el vídeo: Actividad enzimática; efecto de la concentración de sustrato. (Julio 2022).


Comentarios:

  1. Caolan

    ¿De dónde saco mi nobleza?

  2. Winsor

    Hay pequeños comentarios, por supuesto ... Pero en general, todo es cierto. Buen blog, añadido a favoritos.

  3. Eadmund

    Creo que está equivocado. Estoy seguro. Tenemos que hablar.



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